鸭Ⅰ型肝炎病毒、鸭圆环病毒和番鸭细小病毒三重RT PCR检测方法的建立 |
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引用本文: | 谢丽基,谢芝勋,刘加波,庞耀珊,邓显文,谢志勤,范 晴.鸭Ⅰ型肝炎病毒、鸭圆环病毒和番鸭细小病毒三重RT PCR检测方法的建立[J].西北农业学报,2012,21(11):29-33. |
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作者姓名: | 谢丽基 谢芝勋 刘加波 庞耀珊 邓显文 谢志勤 范 晴 |
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作者单位: | 广西壮族自治区兽医研究所广西畜禽疫苗新技术重点实验室 |
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基金项目: | 国家百千万人才工程人选专项资金项目(945200603);广西特聘专家专项经费(2011B020);广西科技项目(桂科攻10100014-5和桂科专项11-3) |
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摘 要: | 为建立可同时鉴别检测鸭Ⅰ型肝炎病毒、鸭圆环病毒和番鸭细小病毒的三重RT-PCR方法,根据基因库中鸭Ⅰ型肝炎病毒、番鸭细小病毒和鸭圆环病毒的基因序列,分别设计3对特异性引物,通过三重RT-PCR扩增条件优化、敏感性和特异性试验,建立了鸭Ⅰ型肝炎病毒、鸭圆环病毒和番鸭细小病毒三重RT-PCR方法。使用该方法对同一样品中的鸭Ⅰ型肝炎病毒、鸭圆环病毒和番鸭细小病毒模板进行扩增,结果均得到与试验设计相符的202bp(鸭Ⅰ型肝炎病毒),351bp(鸭圆环病毒)和474bp(番鸭细小病毒)的特异性扩增条带,对小鸭温病毒、鸭副粘病毒、鸭瘟病毒和禽流感病毒等病原体的检测全为阴性。敏感性试验结果表明,该方法最低能检测到1pg的鸭Ⅰ型肝炎病毒RNA、鸭圆环病毒和番鸭细小病毒DNA。建立的鸭Ⅰ型肝炎病毒、鸭圆环病毒及番鸭细小病毒的三重RT-PCR方法,具有快速、敏感、特异、定量和重复性好等优点,可用于临床鸭Ⅰ型肝炎病毒、鸭圆环病毒及番鸭细小病毒感染的检测。
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关 键 词: | 鸭Ⅰ型肝炎病毒 鸭圆环病毒 番鸭细小病毒 三重RT-PCR |
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