| 转基因延熟番茄"华番一号"的品系特异性检测方法 |
| |
| 引用本文： | 黄文胜,陈红运,赵文军,陈颖,徐宝梁,朱水芳.转基因延熟番茄"华番一号"的品系特异性检测方法[J].植物检疫,2005,19(6):321-325. |
| |
| 作者姓名： | 黄文胜 陈红运 赵文军 陈颖 徐宝梁 朱水芳 |
| |
| 作者单位： | 中国检验检疫科学研究院,北京,100025 |
| |
| 摘 要： | 本文使用反向PCR方法克隆了转基因延熟番茄"华番一号"(Bioscein)的外源基因和番茄基因组之间的一段边界序列,并依据此段序列设计了具有品系特异性的引物和荧光探针,以实时荧光PCR技术建立了华番一号的品系鉴定检测方法,扩增片段长108bp,横跨在Nos启动子和番茄基因组之间.以转基因大豆(RR)、转基因玉米(Mon810)、转基因抗草甘膦油菜、转基因棉花(保龄棉)、非转基因番茄、马铃薯、茄子、大椒、大米、小麦、烟草等为试材,证明本方法同其它转基因作物及其它蔬菜无非特异性反应.本方法在检测华番一号番茄时,相对检测灵敏度可达到0.1%,绝对灵敏度达到20个拷贝.由于本方法的PCR扩增产物长度只有108bp,因此该方法也可以用于检测加工产品中的转基因成分,或作为常规PCR定性检测后的确证实验方法.
|
| 关 键 词： | 品系特异性检测 实时荧光PCR 华番一号 转基因番茄 反向PCR |
| 收稿时间： | 2005-02-28 |
| 修稿时间： | 2005-02-282005-06-20 |
Event-specific transgenic detection of genetically modified Tomato Bioscein with real time PCR method |
| |
| Huang Wensheng,Chen Hongyun,Zhao Wenjun,Chen Yin,Xu Baoliang,Zhu Shuifang.Event-specific transgenic detection of genetically modified Tomato Bioscein with real time PCR method[J].Plant Quarantine,2005,19(6):321-325. |
| |
| Authors: | Huang Wensheng Chen Hongyun Zhao Wenjun Chen Yin Xu Baoliang Zhu Shuifang |
| |
| Abstract: | We report the characterisation of the 5'-flanking sequence of integrated gene-construct of the genetically modified Tomato ( Bioscein) , and the successive development and validation of a transgenic event-specific TaqMan 5'-nuclease PCR assay for detection of Bioscein tomato on the ABI 7700 sequence detector. The limit of detection in pure tomato materials was estimated to approximately 20 template copies . Because of the low number of template copies required for detection, in combination with small size of the amplicon( 108 bp) , the assay may be applied to analyses of raw materials as well as processed food. |
| |
| Keywords: | event-specific detection real-time PCR Bioscein genetically modified tomato inverse PCR |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ |
|
