DBNL蛋白影响A型流感病毒复制机制的研究 |
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引用本文: | 孟德锦,李奇兵,胡玉珍,王一涵,王波,石文军,单智博,姜丽,陈化兰,李呈军.DBNL蛋白影响A型流感病毒复制机制的研究[J].中国预防兽医学报,2023(11):1095-1100. |
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作者姓名: | 孟德锦 李奇兵 胡玉珍 王一涵 王波 石文军 单智博 姜丽 陈化兰 李呈军 |
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作者单位: | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业农村部动物流感重点开放实验室 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(32192453); |
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摘 要: | A型流感病毒(IAV)在宿主细胞内复制过程中需要许多宿主因子的参与,同时IAV也能调控多种宿主因子的表达。为寻找调控IAV复制的宿主因子,本研究通过SDS-PAGE电泳检测发现H1N1亚型流感病毒A/WSN/1933株(简写为WSN)感染A549细胞会上调表达55 ku左右的特异蛋白条带(感染后9 h),将该55 ku左右的蛋白条带切胶回收后进行质谱分析,根据质谱分析的筛选标准选择蛋白得分(Mass score)较高、谱图数(Matches)和序列数(Sequences)较为可信的宿主因子DBNL作为调控IAV复制的潜在研究对象进一步研究。本研究针对DBNL设计特异的siRNA和对照Scrambled si RNA,将其分别转染A549细胞,通过荧光定量PCR确定DBNL si RNA在转录水平的干扰效果显著;利用细胞活力测定试验确定DBNL si RNA的干扰不影响细胞活力。利用DBNL si RNA下调表达A549细胞中的DBNL后,以WSN感染该细胞,在感染后24 h、48 h分别收集细胞上清,利用MDCK细胞进行噬斑滴定试验。试验结果显示,与对照组相比,下调表达DBNL后IAV...
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关 键 词: | 流感病毒 DBNL蛋白 NP蛋白 |
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