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间接ELISA法检测羊促乳素抗体方法的建立
引用本文:于秋丽,赵晓娥,胡林勇.间接ELISA法检测羊促乳素抗体方法的建立[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2009,37(2):47-51.
作者姓名:于秋丽  赵晓娥  胡林勇
作者单位:于秋丽,赵晓娥,胡林勇,马保华,YU Qiu-li,ZHAO Xiao-e,HU Lin-yong,MA Bao-hua(西北农林科技大学,动物医学院,陕西,杨凌,712100);陈玉林,CHEN Yu-lin(西北农林科技大学,动物科技学院,陕西,杨凌,712100)  
基金项目:农业部产业结构调整项目,陕西省科学技术研究发展计划 
摘    要:【目的】建立促乳素单克隆抗体制备中筛选阳性分泌细胞的间接ELISA检测方法。【方法】用促乳素纯品与Freund佐剂免疫6~8周龄雌性BALB/c小鼠,初次免疫采用抗原与完全Freund佐剂,每2周免疫1次,从第2次开始采用抗原与不完全Freund佐剂,免疫4次后尾静脉采血,收集血清制备阳性对照抗体,以未免疫的BALB/c小鼠血清为阴性对照,筛选间接ELISA法检测促乳素抗体的最佳反应条件,并对单克隆抗体制备中的阳性细胞进行筛选。【结果】间接ELISA法的最佳反应条件:血清稀释倍数为1∶200,抗原包被质量浓度为100 ng/mL,封闭液为1%牛血清白蛋白,酶标抗体的工作浓度为1∶10 000,酶标抗体作用时间为37℃90 min,底物作用时间37℃30min。用该方法检测融合的杂交瘤细胞,最终获得OD450为0.875和0.460的阳性细胞株。【结论】建立了检测促乳素抗体的间接ELISA检测方法,该方法方便易行。

关 键 词:促乳素  抗体  间接ELISA法
收稿时间:4/8/2008 12:00:00 AM

Establishment of an indirect ELISA for detection of the antibody of prolactin
YU Qiu-li,ZHAO Xiao-e,HU Lin-yong,CHEN Yu-lin,MA Bao-hua.Establishment of an indirect ELISA for detection of the antibody of prolactin[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2009,37(2):47-51.
Authors:YU Qiu-li  ZHAO Xiao-e  HU Lin-yong  CHEN Yu-lin  MA Bao-hua
Institution:a(a.College of Animal Veterinary Medicine,b.College of Animal Science and Technology,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China)
Abstract:
Keywords:
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