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| 单核细胞增生李斯特氏菌依赖解旋酶DNA恒温扩增检测方法的建立 | |
| 引用本文： | 王建广,雷质文,石琰璟,付静芸,祝素珍,房保海,姜英辉,刘云国,张健,杨大伟.单核细胞增生李斯特氏菌依赖解旋酶DNA恒温扩增检测方法的建立[J].中国预防兽医学报,2011,33(2). |
| 作者姓名： | 王建广 雷质文 石琰璟 付静芸 祝素珍 房保海 姜英辉 刘云国 张健 杨大伟 |
| 作者单位： | 1. 青岛科技大学,山东,青岛,266042;山东出入境检验检疫局,山东,青岛,266002 2. 山东出入境检验检疫局,山东,青岛,266002 3. 青岛科技大学,山东,青岛,266042 4. 中国海洋大学,山东,青岛,266003 |
| 基金项目： | 国家质检总局科研项目(2008IK140); 山东出入境检验检疫局科研项目(SK200821) |
| 摘 要： | 为建立单核细胞增生李斯特氏菌(Lm)的依赖解旋酶DNA恒温扩增(HDA)检测方法,本研究以Lm的iap基因为目的片段设计特异性引物,建立了可在65℃恒温扩增快速(90 min)检测Lm的HDA检测方法,分别对反应体系中的MgAc2、Bst聚合酶、UvrD解旋酶、dNTPs以及引物等的浓度进行优化,进行了特异性和灵敏度试验,并与普通PCR方法进行了比较。结果表明,所建立起的检测法最低检测限为7.8×103 cfu/mL,灵敏度与普通PCR方法相当。Lm的HDA检测方法具有普通PCR的特异、灵敏等特点,并且对仪器要求更低,具有良好的应用前景。 |
| 关 键 词： | 单核细胞增生李斯特氏菌 检测 依赖解旋酶DNA恒温基因扩增 |
Establishment of the Helicase-dependent isothermal DNA amplification method of detecting Listeria monocytogenes |
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| WANG Jian-guang,LEI Zhi-wen,SHI Yan-jing,FU Jing-yun,ZHU Su-zhen,FANG Bao-hai,JIANG Ying-hui,LIU Yun-guo,ZHANG Jian,YANG Da-wei.Establishment of the Helicase-dependent isothermal DNA amplification method of detecting Listeria monocytogenes[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2011,33(2). | |
| Authors: | WANG Jian-guang LEI Zhi-wen SHI Yan-jing FU Jing-yun ZHU Su-zhen FANG Bao-hai JIANG Ying-hui LIU Yun-guo ZHANG Jian YANG Da-wei |
| Institution: | WANG Jian-guang1,2,LEI Zhi-wen2*,SHI Yan-jing1,FU Jing-yun3,ZHU Su-zhen2,FANG Bao-hai2,JIANG Ying-hui2,LIU Yun-guo2,ZHANG Jian2,YANG Da-wei2(1.Qingdao University of Science & Technology,Qingdao 266042,China,2.Shandong Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,Qingdao 266002,3.Ocean University of China,Qingdao 266003,China) |
| Abstract: | |
| Keywords: | Listeria monocytogenes Detection Helicase-dependent isothermal DNA amplification |
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