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独行菜LaSPS基因的克隆与生物信息学分析及原核表达
引用本文:赵乐,马利刚,韩杜菀,冯卫生,郑晓珂.独行菜LaSPS基因的克隆与生物信息学分析及原核表达[J].北方园艺,2016(6):92-99.
作者姓名:赵乐  马利刚  韩杜菀  冯卫生  郑晓珂
作者单位:河南中医学院药学院,河南郑州450046;呼吸疾病诊疗与新药研发河南省协同创新中心 河南郑州450046;河南中医学院药学院,河南郑州,450046
基金项目:国家重点基础研究发展计划“973计划”资助项目(2013CB531802),河南中医学院博士科研基金资助项目(BSJJ2011-07).
摘    要:以独行菜(Lepidium apetalum)幼苗叶片为试材,采用PCR方法,扩增得到LaSPS基因的开放阅读框(open reading frame,ORF),构建pET-32a-LaSPS原核表达载体并在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中表达LaSPS重组蛋白。结果表明:LaSPS基因ORF长1 269bp,编码422个氨基酸,包含茄呢醇焦磷酸合酶结构域,是异戊烯基合成酶家族的成员;序列分析发现,LaSPS蛋白定位于叶绿体中,不含信号肽没有跨膜区;通过序列比对和系统进化分析,显示LaSPS蛋白与拟南芥(Arabidopsis thaliana)AtSPS2蛋白相似度为91%,亲缘关系最近;在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中成功表达LaSPS重组蛋白,为研究LaSPS基因在独行菜质体醌生物合成途径中的功能奠定了基础。

关 键 词:独行菜  茄呢醇焦磷酸合酶  基因克隆  序列分析  原核表达

Cloning and Bioinformatic Analysis and Prokaryotic Expression of LaSPS Gene From Lepidium apetalum
ZHAO Le,MA Ligang,HAN Duwan,FENG Weisheng,ZHENG Xiaoke.Cloning and Bioinformatic Analysis and Prokaryotic Expression of LaSPS Gene From Lepidium apetalum[J].Northern Horticulture,2016(6):92-99.
Authors:ZHAO Le  MA Ligang  HAN Duwan  FENG Weisheng  ZHENG Xiaoke
Abstract:
Keywords:
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