| 罗非鱼无乳链球菌gap基因的原核表达及免疫原性研究 |
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| 引用本文： | 杨洋,农源,陈林,孙彤彤,黄远城,李恭贺,郑喜邦,吴文德.罗非鱼无乳链球菌gap基因的原核表达及免疫原性研究[J].现代畜牧兽医,2023(10):1-5. |
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| 作者姓名： | 杨洋 农源 陈林 孙彤彤 黄远城 李恭贺 郑喜邦 吴文德 |
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| 作者单位： | 1. 广西大学动物科学技术学院;2. 广西壮族自治区兽用生物制品工程研究中心;3. 广西畜禽繁育与疾病防控重点实验室;4. 广西高校动物疫病预防与控制重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家现代农业产业技术体系广西创新团队“十三五”研究(2016LFY0301)； |
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| 摘 要： | 试验旨在探究罗非鱼无乳链球菌(GBS)膜蛋白gap的免疫原性。试验提取GBS的DNA,利用PCR扩增出gap基因,并与表达载体pET-28a-SUMO构建重组质粒,转化至大肠杆菌BL21;经IPTG诱导、SDS-PAGE分析和Western blot检测确定其表达效果。采用纯化的gap蛋白与弗氏佐剂乳化腹腔注射免疫罗非鱼,以间接ELISA法检测血清效价并使用GBS进行攻毒试验。结果显示,PCR扩增出1 011 bp大小的单条带gap基因,与预期一致;重组载体pET-28a-gap在23℃、0.4 mmol/L IPTG、12 h条件下成功表达49.8 ku的可溶性蛋白;ELISA检测显示,重组蛋白gap能够产生较高的血清抗体效价水平,对GBS攻毒后的罗非鱼相对保护率为64.1%。研究表明,重组蛋白gap具有较好的免疫原性,为鱼类的链球菌病的预防提供新的理论依据。
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| 关 键 词： | 罗非鱼 无乳链球菌 gap基因 原核表达 重组蛋白疫苗 主动免疫 |
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