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原核表达番木瓜环斑病毒NIa-Pro及其双重酶活鉴定
引用本文:韩杰,郑继平,言普,庹德财,黎小瑛,沈文涛,周鹏.原核表达番木瓜环斑病毒NIa-Pro及其双重酶活鉴定[J].热带作物学报,2016,37(4):722-727.
作者姓名:韩杰  郑继平  言普  庹德财  黎小瑛  沈文涛  周鹏
作者单位:1. 海南大学农学院,海南海口 570228;中国热带农业科学院热带生物技术研究所,海南海口 571101;2. 海南大学农学院,海南海口,570228;3. 中国热带农业科学院热带生物技术研究所,海南海口,571101
基金项目:国家自然科学基金(No.31371918);海南省重大科技专项(No.ZDZX2013023)
摘    要:番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)编码的核内涵体蛋白a蛋白酶(Nuclear inclusion body a proteinase,NIa-Pro)是一种多功能病毒非结构蛋白,在病毒侵染宿主及病毒与宿主互作中起着重要作用。本研究利用以麦芽糖结合蛋白(MBP)为融合表达框架的原核表达系统构建了表达NIa-Pro的重组载体pMAL-c5xNP,并转化大肠杆菌,经IPTG诱导和Ni~(2+)-NTA-琼脂糖亲和层析纯化获得了可溶的重组融合蛋白MBP-NIa(N端和C端分别融合MBP和His标签),然后利用蛋白酶Factor Xa切去重组融合蛋白中的MBP,再通过直链淀粉树脂亲和层析纯化获得了可溶的重组蛋白NIa-Pro。活性检测结果表明,重组蛋白PRSV-NIa-Pro具有非特异的双链DNA酶和特异的蛋白酶双重活性。

关 键 词:NIa-Pro  番木瓜环斑病毒  原核表达  蛋白酶  DNA酶

Prokaryotic Expression and Biological Activity of NIa-Pro Protein from Papaya Ringspot Virus
HAN Jie,ZHENG Jiping,YAN Pu,TUO Decai,LI Xiaoying,SHEN Wentao and ZHOU Peng.Prokaryotic Expression and Biological Activity of NIa-Pro Protein from Papaya Ringspot Virus[J].Chinese Journal of Tropical Crops,2016,37(4):722-727.
Authors:HAN Jie  ZHENG Jiping  YAN Pu  TUO Decai  LI Xiaoying  SHEN Wentao and ZHOU Peng
Institution:HAN Jie;ZHENG Jiping;YAN Pu;TUO Decai;LI Xiaoying;SHEN Wentao;ZHOU Peng;College of Agriculture, Hainan University;Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology,CATAS;
Abstract:
Keywords:NIa-Pro  Papaya ringspot virus  Prokaryotic expression  Proteinase  DNase
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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