| 甜菜夜蛾几丁质脱乙酰酶基因(secda 5)的原核表达及多克隆抗体制备 |
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| 引用本文： | 李景,杨宝东,郭巍.甜菜夜蛾几丁质脱乙酰酶基因(secda 5)的原核表达及多克隆抗体制备[J].北京农学院学报,2016,31(1):38-41. |
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| 作者姓名： | 李景 杨宝东 郭巍 |
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| 作者单位： | 北京农学院植物科学技术学院,北京,102206;北京农学院植物科学技术学院,北京,102206;北京农学院植物科学技术学院,北京,102206 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，现代农业产业技术体系项目，2014年北京农学院学位与研究生教育改革与发展项目 |
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| 摘 要： | 目的]几丁质脱乙酰酶(Chitin deacetylase,CDA,EC 3.5.1.41)是昆虫几丁质代谢中的一种关键酶,在昆虫生长、发育和代谢中具有重要作用.本研究旨在克隆甜菜夜蛾secda5基因,对其进行原核表达,同时制备其蛋白的多克隆抗体.方法]以pMD19-T-secda5重组质粒为模板,通过PCR技术获得编码甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)中肠几丁质脱乙酰酶secda5全长基因,连接pET-28a载体并转化E.coli BL21 (DE3)构建工程菌.以不同IPTG浓度、培养温度对目的蛋白进行诱导表达.结果]IPTG终浓度为0.50 mmol/L、37℃诱导培养4h时蛋白表达量最高.诱导表达获得的重组蛋白经纯化后制备多克隆抗体.结论]此研究成功克隆了甜菜夜蛾secda 5基因,并进行了原核表达以及多克隆抗体的制备.
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| 关 键 词： | 甜菜夜蛾 secda 5 基因克隆 原核表达 抗体制备 |
Prokaryotic expression and polyclonal antibody preparation of chitin deacetylase(secda5) from Spodoptera exigua |
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| LI Jing,YANG Baodong,GUO Wei.Prokaryotic expression and polyclonal antibody preparation of chitin deacetylase(secda5) from Spodoptera exigua[J].Journal of Beijing Agricultural College,2016,31(1):38-41. |
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| Authors: | LI Jing YANG Baodong GUO Wei |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Spodoptera exigua secda 5 gene clone prokaryotic expression polyclonal antibody preparation |
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