| 欧洲鳗鲡免疫球蛋白轻链基因的克隆及表达分析 |
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| 引用本文： | 冯建军,郭松林,林鹏.欧洲鳗鲡免疫球蛋白轻链基因的克隆及表达分析[J].华中农业大学学报,2015,34(5):81-89. |
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| 作者姓名： | 冯建军 郭松林 林鹏 |
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| 作者单位： | 集美大学水产学院/鳗鲡现代产业技术教育部工程研究中心/农业部东海海水健康养殖重点实验室，厦门 361021;集美大学水产学院/鳗鲡现代产业技术教育部工程研究中心/农业部东海海水健康养殖重点实验室，厦门 361021;集美大学水产学院/鳗鲡现代产业技术教育部工程研究中心/农业部东海海水健康养殖重点实验室，厦门 361021 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目 (31272685)； 福建省教育厅项目 (JA11150)； 福建省海洋与渔业厅项目 (201212140006)； 集美大学科研基金项目(C60819) |
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| 摘 要： | 通过RT-PCR技术克隆欧洲鳗鲡(Anguilla anguilla)Ig轻链基因cDNA全长序列,命名为AaIgL,其全长为1 016bp,开放阅读框为714bp,编码238个氨基酸。将该基因片段与pET-his载体连接构建原核表达载体,在大肠杆菌BL21中诱导表达,其表达产物经SDS-PAGE和Western blotting分析,结果表明新增的27ku蛋白条带与预期值相符,且与兔抗欧洲鳗鲡IgM血清发生特异性显色反应,证实了AaIgL基因能够在大肠杆菌中以包涵体形式高效表达;实时荧光定量PCR检测结果发现:AaIgL在欧洲鳗鲡各组织中均有表达,其中脾脏的表达量最高,肾脏和心脏中也有较高的表达水平,而肝脏、肌肉、鳃以及肠中的表达量较低;欧洲鳗鲡经山羊IgG肌肉注射后脾脏和肾脏的AaIgL表达水平明显上升,其峰值分别为第7天和第14天,AaIgL在脾脏的表达量显著高于肾脏,但是第21天后均恢复至正常水平。以上结果表明,AaIgL在欧洲鳗鲡机体免疫防御中发挥重要作用,脾脏是AaIgL基因的主要表达器官。
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| 关 键 词： | 欧洲鳗鲡 免疫球蛋白轻链 原核表达 荧光定量 PCR |
| 收稿时间： | 2014/12/9 0:00:00 |
Molecular cloning and expression analysis of immunoglobulin light chain gene in Anguilla anguilla |
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