| 新疆红肉苹果转录因子MsMYB10基因的克隆、序列分析及原核表达 |
| |
| 引用本文： | 王延玲,张艳敏,冯守千,田长平,王海波,刘遵春,宋杨,陈学森.新疆红肉苹果转录因子MsMYB10基因的克隆、序列分析及原核表达[J].中国农业科学,2010,43(13). |
| |
| 作者姓名： | 王延玲 张艳敏 冯守千 田长平 王海波 刘遵春 宋杨 陈学森 |
| |
| 作者单位： | （山东农业大学园艺科学与工程学院/作物生物学国家重点实验室） |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金，国家"863"计划重点项目，山东省农业良种工程项目 |
| |
| 摘 要： | 【目的】克隆新疆红肉苹果Malus sieversii f.neidzwetzkyana(Dieck)Langenf]MYB10转录因子基因,进行序列分析和原核表达研究,为进一步探索红色发育机理及选育新的栽培红肉苹果奠定理论基础。【方法】根据MdMYB10基因编码区设计1对特异引物,以新疆红肉苹果叶片总RNA为模板,通过RT-PCR获得1个约700bp的cDNA片段,T/A克隆后进行序列测定,并对该序列进行分析。随后将该基因片段连接到原核表达载体pET-30a(+)中,构建融合表达质粒,转化到E.coli BL21(DE3)中进行表达。【结果】测序结果显示,RT-PCR获得的cDNA全长包含完整的cDNA开放读码框732bp,编码244个氨基酸,命名为MsMYB10。MsMYB10分子量为28.56kD,等电点为8.41,GenBank登录号为GQ500894。该蛋白具有R2R3MYB结构域,结构域中有保守的色氨酸残基,在C端有1个富含酸性氨基酸的转录激活区。与已知MdMYB10的氨基酸序列的同源性为98%。另外,MsMYB10没有信号肽,具有核定位信号。进化树分析表明,MsMYB10与调控花青苷合成的转录因子MdMYB10亲缘关系最近,处在同一进化枝。SDS-PAGE电泳检测结果表明,表达蛋白与预期蛋白大小一致。【结论】克隆了新疆红肉苹果转录因子MsMYB10基因,并可在大肠杆菌中转化表达。为进一步纯化和鉴定目的蛋白及研究其功能奠定了试验基础。
|
| 关 键 词： | 新疆红肉苹果 MsMYB10转录因子 序列分析 原核表达 |
| 收稿时间： | 2010-01-26; |
Cloning, Sequence Analysis and Expression in E.coli of MsMYB10 Gene from Malus sieversiif.neidzwetzkyana |
| |
| WANG Yan-ling,ZHANG Yan-min,FENG Shou-qian,TIAN Chang-ping,WANG Hai-bo,LIU Zun-chun,SONG Yang,CHEN Xue-sen.Cloning, Sequence Analysis and Expression in E.coli of MsMYB10 Gene from Malus sieversiif.neidzwetzkyana[J].Scientia Agricultura Sinica,2010,43(13). |
| |
| Authors: | WANG Yan-ling ZHANG Yan-min FENG Shou-qian TIAN Chang-ping WANG Hai-bo LIU Zun-chun SONG Yang CHEN Xue-sen |
| |
| Institution: | (College of Horticulture Science and Engineering/State Key Laboratory of Crop Biology, Shandong Agricultural University) |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Malus sieversii f neidzwetzkyana MsMYB10 sequence analysis prokaryotic expression |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《中国农业科学》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《中国农业科学》下载免费的PDF全文 |
|
