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| 新城疫病毒荧光RT-PCR检测方法的建立及应用 | |
| 引用本文： | 商雨,郭静,王红琳,罗青平,胡薛英,邵华斌,程国富,温国元.新城疫病毒荧光RT-PCR检测方法的建立及应用[J].中国兽医学报,2013,33(8). |
| 作者姓名： | 商雨 郭静 王红琳 罗青平 胡薛英 邵华斌 程国富 温国元 |
| 作者单位： | 1. 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,湖北武汉430209;华中农业大学动物医学院,湖北武汉430070 2. 华中农业大学动物医学院,湖北武汉,430070 3. 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,湖北武汉,430209 |
| 基金项目： | 现代肉鸡产业体系建设专项资金资助项目，国家自然科学基金资助项目，国家公益性行业(农业)科研专项资助项目 |
| 摘 要： | 经对部分发表在NCBI里的新城疫病毒序列进行比对,在其F基因上找到1段相对保守序列,根据保守序列设计1对引物和1条TaqMan探针,以新城疫Ⅰ系疫苗株(Mukteswar株)作为标准品,通过系列条件优化、特异性、灵敏性和重复性试验,建立了一种灵敏度高、特异性强和重复性好的荧光RT-PCR检测新城疫病毒的方法.该方法能检测最低初始病毒浓度为102.2 ELD50/mL,且在108.2～102.2 ELD50/mL内Ct值与病毒浓度的对数值(lgELD50/mi)呈很好的线性关系,R2达到0.997 5；该方法对禽流感、禽痘病毒和禽大肠杆菌等禽病病原核酸无交叉反应；批间和批内重复性良好；临床样品检测中荧光RT-PCR与鸡胚分毒的符合率、诊断灵敏度和诊断特异性分别为98.5％,50.0％和98.4％.因此,荧光RT-PCR检测方法的建立为新城疫病毒检测提供了一种快速有效的方法,为新城疫病毒的研究奠定了一定的基础. |
| 关 键 词： | 荧光RT-PCR 新城疫病毒 F基因 |
Establishment and application of fluorescent RT-PCR for detection of Newcastle disease virus |
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| Abstract: | |
| Keywords: | fluorescent RT-PCR Newcastle disease virus F gene |
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