| 猪圆环病毒Ⅱ型Cap蛋白重组腺病毒的构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 王先炜,姜平,李玉峰,蒋文明,汤景元.猪圆环病毒Ⅱ型Cap蛋白重组腺病毒的构建与鉴定[J].畜牧市场,2009(8):11-14. |
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| 作者姓名： | 王先炜 姜平 李玉峰 蒋文明 汤景元 |
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| 作者单位： | 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏南京,210095 |
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| 摘 要： | 猪圆环病毒Ⅱ型（PCV2）是近年来新发现的引起仔猪多系统衰弱综合症的必需病原，含有两个主要的阅读框ORF1和ORF2，分别编码复制相关蛋白（Rep）和核衣壳蛋白（Cap），其中Cap含有病毒主要抗原表位，是研究PCV2基因工程苗的主要候选目的基因。本研究利用PCR技术将Cap蛋白基因克隆入人5型腺病毒穿梭载体（pShuttle-CMV），与腺病毒骨架载体（pAdEasyTM）共转化大肠杆菌BJ5183进行同源重组并转染HEK-293A细胞，经多次亚克隆获得了重组腺病毒tAd-Cap，测定其TCID50为1015．7／mL。用RT—PCR、间接ELISA、Westernbfot和IPMA等方法证明了Cap蛋白在腺病毒中获得表达。该研究为发展PCV2的重组腺病毒基因工程疫苗奠定了基础。
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| 关 键 词： | Ⅱ型猪圆环病毒 Cap蛋白 重组 腺病毒 构建 |
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