重组猪干扰素α6在毕赤酵母中表达及其活性研究 |
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引用本文: | 钟颖,牛婷,代洪波,蔡雨函,廖果,王雪涛,林艳,卓秀萍,周远成.重组猪干扰素α6在毕赤酵母中表达及其活性研究[J].湖北畜牧兽医,2018(8). |
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作者姓名: | 钟颖 牛婷 代洪波 蔡雨函 廖果 王雪涛 林艳 卓秀萍 周远成 |
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作者单位: | 四川华神兽用生物制品有限公司/畜禽生物制品四川省重点实验室/四川省动物生物制品工程技术研究中心 |
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摘 要: | 为获得稳定表达重组猪α6干扰素的毕赤酵母。人工合成Po IFN-α6基因片段,连接至pPICZαA质粒,构建PoIFN-α6毕赤酵母表达质粒pPICZαA-PoIFNα6;经Sac I酶线性化后转化至毕赤酵母X33感受态细胞,筛选阳性克隆;优化毕赤酵母表达条件,并对表达产物进行了体外抗病毒活性测定。结果表明,成功构建了表达重组猪α6干扰素的毕赤酵母,以1%甲醇诱导72 h后,菌体上清SDS-PAGE可见20 kDa左右目的条带,Western blot检测为阳性;表达的重组猪干扰素α活性在PRRSV/Marc-145、VSV/MDBK、PRV/Vero、PEDV/Vero、PPV/PK-15、PCV2/PK-15和TGEV/PK-15系统中均具有良好的抗病毒活性。说明PoIFN-α6在细胞上清中表达成功,并且在不同宿主细胞中均有抗病毒活性。
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