| 利用CRISPR/Cas9技术创建OsGPRP家族基因突变体 |
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| 引用本文： | 王鑫,刘丹阳,欧阳解秀,彭辉,李绍波,阎新.利用CRISPR/Cas9技术创建OsGPRP家族基因突变体[J].分子植物育种,2018(15). |
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| 作者姓名： | 王鑫 刘丹阳 欧阳解秀 彭辉 李绍波 阎新 |
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| 作者单位： | 南昌大学生命科学学院;南昌大学医学实验教学中心 |
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| 摘 要： | 本研究利用CRISPR/Cas9技术对水稻OsGPRP家族基因进行敲除,在3个水稻OsGPRP基因的第一个外显子PAM序列区域各设计一个靶位点,并将3个靶位点的sg RNA进行串连,成功构建了3个OsGPRP基因同时敲除的CRISPR/Cas9载体;采用根癌农杆菌介导的遗传转化获得了60株T0代CRISPR转基因植株;通过PCR扩增和测序分析,我们获得了2种不同类型的OsGPRP3单基因突变材料;6种不同类型的OsGPRP2/OsGPRP3两基因突变植株;1种类型的OsGPRP1/OsGPRP3两基因纯合突变植株和4种不同类型的OsGPRP1/OsGPRP2/OsGPRP3三基因突变材料,为进一步研究OsGPRP家族基因的生物学功能及其相互关系提供遗传材料。
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