CRISPR/Cas9介导靶向敲除拟南芥MS2基因突变体的鉴定 |
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引用本文: | 石晶,杨亚珺,管翠萍.CRISPR/Cas9介导靶向敲除拟南芥MS2基因突变体的鉴定[J].分子植物育种,2018(16). |
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作者姓名: | 石晶 杨亚珺 管翠萍 |
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作者单位: | 宁夏大学生命科学学院 |
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摘 要: | CRISPR/Cas9(Clustered regulatory interspaced short palindromic repeat/Cas9)基因编辑技术在生命科学领域掀起了一场重大的技术革命,它比锌指核酸酶(ZFNs)和转录激活因子效应物核酸酶(TALENs)技术更易于操作,而且更高效。CRISPR/Cas9系统已经被广泛应用到植物科学研究领域中。本实验选取拟南芥MS2为目的基因,构建植物基因编辑系统的表达载体,并通过农杆菌介导的方法转化拟南芥,从而利用CRISPR/Cas9系统靶向敲除拟南芥MS2基因。对转基因后代的MS2测序结果分析表明,在获得的12个阳性转化植株中,发现了5个阳性植株存在基因序列上的新碱基插入,由此形成CRISPR/Cas9介导的拟南芥MS2突变体。这一工作为后续分析其他物种中MS2同源基因的功能研究提供参考依据。
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