云南高海拔地区桃种质资源ISSR体系的建立和优化 |
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引用本文: | 颜景,杨荣萍,张玉,杨春雷,杨正安.云南高海拔地区桃种质资源ISSR体系的建立和优化[J].分子植物育种,2018(1). |
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作者姓名: | 颜景 杨荣萍 张玉 杨春雷 杨正安 |
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作者单位: | 云南农业大学园林园艺学院; |
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摘 要: | 本试验以云南高海拔地区桃种质资源的样本为试验材料,从提取的100余份DNA样品中随机抽取1份,再用初筛的引物UBC-891,用于ISSR体系的优化。根据单因素试验和正交试验设计,本研究发现了最佳ISSR-PCR反应体系。研究结果表明:25μL的ISSR反应体系中,2.5μL 10×PCR buffer(含 Mg~(2+)),1.5 mmol/L Mg~(2+),2.0 U Taq-DNA聚合酶,0.10 mmol/L dNTPs,0.40μmol/L引物,45 ng DNA组合最佳。Taq-DNA聚合酶浓度对反应影响最大。本研究为引物筛选和云南高海拔地区桃种质资源ISSR遗传多样性研究提供了理论基础。
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