| 高效荧光定量PCR探针的筛选及HBV-DNA检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 刘利军,姚松坡,呼和巴特尔.高效荧光定量PCR探针的筛选及HBV-DNA检测方法的建立[J].内蒙古农业大学学报(自然科学版),2012,33(3):125-129. |
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| 作者姓名： | 刘利军 姚松坡 呼和巴特尔 |
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| 作者单位： | 1. 内蒙古农业大学兽医学院,呼和浩特,010018
2. 海口维瑅瑷生物研究院,海口,570311 |
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| 摘 要： | 目的:筛选一套灵敏度高、特异性强的引物探针,用于建立检测HBV病毒载量的荧光定量PCR方法.方法:通过PCR方法扩增HBV基因组片段,与T载体连接,制备工作标准品,并运用设计的荧光定量PCR对HBV DNA国家标准品进行检测.结果:以pMD18-T-HBc作为标准品,HBcF和HBcR为上下游引物,HBcP为探针所建立的荧光定量PCR检测HBV病毒载量方法的线性范围为109copies/mL到103copies/mL,批内重复性变异系数为0.20％一1.44％,批间重复性变异系数为3.08％～5.63％,检测国家阴阳性标准品的特异性灵敏度为100％,国家线性标准品的检测值与理论值的线性相关系数R为0.998.结论:成功筛选出一套荧光定量PCR检测HBV DNA的引物探针,并已建立了一种特异性灵敏性均非常高的荧光定量PCR检测HBV DNA的方法.
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| 关 键 词： | 乙型肝炎病毒 荧光定量PCR Taqman探针 标准品 |
SCREENING OF HIGHLY EFFECTIVE PROBE FOR REAL-TIME PCR AND DEVELOPMENT OF DETECTED HEPATITIS BVIRUS DNA |
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| LIU Li-jun
,
YAO Song-po
,
Huhebatcr.SCREENING OF HIGHLY EFFECTIVE PROBE FOR REAL-TIME PCR AND DEVELOPMENT OF DETECTED HEPATITIS BVIRUS DNA[J].Journal of Inner Mongolia Agricultural University(Natural Science Edition),2012,33(3):125-129. |
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| Authors: | LIU Li-jun YAO Song-po Huhebatcr |
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| Institution: | LIU Li-jun1,YAO Song-po2,Huhebater1(1.College of Veterinary,Inner Mongolia Agricultural University,Hohhot 010018,China; 2.Haikou VTI Biological Institute,Haikou 570311,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Hepatitis B virus fluorescence quantitative PCR Taqman probe standard |
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