猪α干扰素基因的表达及其单克隆抗体的制备与鉴定 |
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引用本文: | 曾翠平,王晓杜,戴汉川,龙良启,伍晓雄.猪α干扰素基因的表达及其单克隆抗体的制备与鉴定[J].华中农业大学学报,2008,27(3). |
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作者姓名: | 曾翠平 王晓杜 戴汉川 龙良启 伍晓雄 |
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作者单位: | 华中农业大学动物医学院,武汉,430070 |
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摘 要: | 将猪IFN-α(poIFN-α)成熟蛋白基因克隆于pET-28a载体中,转染大肠杆菌,并进行诱导表达.经SDS-PAGE检测,融合表达的蛋白poIFN-α大小约27ku.收获融合表达的poIFN-α,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,通过间接ELISA方法对融合细胞进行检测,结果获得了1株能稳定分泌抗poIFN-α蛋白抗体的杂交瘤细胞株,命名为2H12株.Western-blotting结果及单克隆抗体亚型鉴定结果表明,单抗与重组蛋白发生特异性反应,单抗为IgG1亚型,且轻链为κ链.
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关 键 词: | 猪 α-干扰素 原核表达 单克隆抗体 |
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