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| 鸽Beclin 1基因克隆、原核表达与多克隆抗体制备 | |
| 引用本文： | 李铭,张志国,胡敏,张奕婷,刘爽.鸽Beclin 1基因克隆、原核表达与多克隆抗体制备[J].中国家禽,2018(17). |
| 作者姓名： | 李铭 张志国 胡敏 张奕婷 刘爽 |
| 作者单位： | 大庆师范学院生物工程学院;福瑞邦集团 |
| 摘 要： | 为了更好地理解自噬与禽类某些疾病的发生关系,研究制备了自噬重要标志性蛋白Beclin 1的多克隆抗体。首先克隆了鸽Beclin 1基因的部分保守序列,运用基因重组方法构建了pET52b-beclin 1原核表达载体,IPTG诱导后得到重组表达蛋白,采用镍柱纯化法得到目标蛋白。SDS-PAGE结果显示,所得到的目标蛋白分子量与预测值一致,表明纯化得到了高纯度目标蛋白。以目标蛋白为抗原免疫新西兰大白兔,5免后制备抗血清。ELISA结果显示效价为1∶20 000,Western blot显示抗体具有良好的特异性。结果为检测自噬相关禽类疾病的发生中Beclin 1基因的蛋白表达提供了必要的抗体基础。 |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ | |