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血清8型禽腺病毒纤突蛋白基因的克隆表达及多克隆抗体的制备
引用本文:路浩,张伟,王伟康,梁广成,王萍,张建军,郑文铝,邵红霞,秦爱建,邹海涛,叶建强.血清8型禽腺病毒纤突蛋白基因的克隆表达及多克隆抗体的制备[J].中国家禽,2018(4).
作者姓名:路浩  张伟  王伟康  梁广成  王萍  张建军  郑文铝  邵红霞  秦爱建  邹海涛  叶建强
作者单位:扬州大学兽医学院禽类预防医学教育部重点实验室江苏省动物预防医学重点实验室;江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;国药集团扬州威克生物工程有限公司;教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室;
摘    要:研究首先对血清8型禽腺病毒(FAd V-8)的纤突蛋白基因F进行了克隆并分别构建了原核表达载体和真核表达载体,经测序验证后分别命名为p GEX-6P-1-F和pc DNA3.1-F。将原核表达质粒pGEX-6P-1-F转化BL21,经IPTG诱导,获得了FAd V-8 F蛋白的GST-F可溶性融合表达产物。将纯化的GST-F蛋白免疫BALB/c小鼠制备了抗FAd V-8 F蛋白的多克隆抗体。Western blot结果证明,制备的抗FAd V-8 F蛋白的多克隆抗体能特异性地识别转染pc DNA3.1-F或感染FAd V-8病毒细胞中57 ku大小的蛋白条带。间接免疫荧光试验同样证明,抗FAd V-8的F蛋白的多克隆抗体具有良好的反应性及特异性。研究结果为进一步建立FAd V-8快速血清学诊断方法、亚单位疫苗研制及探究纤突蛋白F在病毒感染致病中作用奠定了基础。

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