禽坦布苏病毒E基因与沙门菌鞭毛保守区的嵌合表达研究 |
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引用本文: | 施少华,程龙飞,傅光华,陈红梅,万春和,傅秋玲,刘荣昌,林建生,黄瑜.禽坦布苏病毒E基因与沙门菌鞭毛保守区的嵌合表达研究[J].中国家禽,2018(10). |
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作者姓名: | 施少华 程龙飞 傅光华 陈红梅 万春和 傅秋玲 刘荣昌 林建生 黄瑜 |
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作者单位: | 福建省农业科学院畜牧兽医研究所;福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心;福建省禽病防治重点实验室 |
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摘 要: | 利用PCR方法从禽坦布苏病毒和肠炎沙门菌分别扩增出E基因和鞭毛基因保守片段(Flic AC和Flic DB),随后通过over-lapping PCR方法将Flic AC片段、E基因和Flic DB片段依序串联后获得Flic AC-E-Flic DB目的片段,克隆到p MD18-T载体中获得重组质粒p MD-Flic AC-E-Flic DB,经Bam HⅠ和HindⅢ双酶切后接入p ET-32a载体,构建原核表达重组质粒p ET-Flic AC-E-Flic DB。表达质粒转化入感受态细胞BL21(DE3)后,经IPTG诱导后表达出Flic AC-E-Flic DB嵌合蛋白,Western-blot鉴定证实与预期融合蛋白一致。
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