中性植酸酶的克隆、表达、纯化及酶学性质研究 |
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引用本文: | 彭沫溱,董岩岩,唐湘华,李俊俊,谢振荣,杨芳,何莉梅,黄遵锡.中性植酸酶的克隆、表达、纯化及酶学性质研究[J].饲料研究,2012(6):25-28. |
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作者姓名: | 彭沫溱 董岩岩 唐湘华 李俊俊 谢振荣 杨芳 何莉梅 黄遵锡 |
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作者单位: | 1. 生物能源持续开发利用教育部工程研究中心 2. 云南省教育厅酶工程重点实验室 3. 云南省生物质能与环境生物技术重点实验室 |
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基金项目: | 农业科技成果转化资金项目;耐热、高效饲用NSP复合酶的产业化开发及在生猪养殖业中的应用示范;项目,云南省应用基础研究重点项目;热泉中高温酶功能基因的研究与评价;项目 |
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摘 要: | 基于454高通量测序枯草芽孢杆菌I4全基因组,获得一个编码中性植酸酶的基因Bpp,该基因全长为1 149 bp,编码382个氨基酸组成的多肽,成熟蛋白的理论相对分子质量为42 590.将基因Bpp克隆到表达载体pET28a(+),并在大肠杆菌BL21( DE3)中表达,表达产物具有植酸酶活性,利用组氨酸标签纯化并初步研究其酶学性质.结果表明:酶作用的最适pH为7.5,最适温度为55℃,Km为38.76 mmol/L,Vmax为2.34 U/mg,比活力为6.054 U/mg,中性植酸酶活性依赖Ca2+.
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关 键 词: | 中性植酸酶 基因克隆 表达 纯化 酶学性质 |
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