| 硅胶干燥罗布麻叶片DNA提取及RAPD反应体系建立 |
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| 引用本文： | 苏前,吕杰,任曼丽,冉启洋,张雪妮,吕光辉.硅胶干燥罗布麻叶片DNA提取及RAPD反应体系建立[J].新疆农业科学,2013,50(3):524. |
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| 作者姓名： | 苏前 吕杰 任曼丽 冉启洋 张雪妮 吕光辉 |
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| 作者单位： | 新疆大学资源与环境科学学院/绿洲生态教育部重点实验室,乌鲁木齐,830046 |
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| 摘 要： | 目的]得到适用于罗布麻RAPD的最优体系.方法]以伊犁地区新源县罗布麻硅胶干燥叶片为材料,采用TIANGEN试剂盒提取罗布麻基因组DNA,得到满足RAPD(Random amplified polymorphic DNA)分析的罗布麻基因组DNA.结果]通过单因素优化实验,得到罗布麻RAPD分析的最佳反应体系为:Mg2+ (2.0mmol/L)、dNTPs(0.5 mmol./L)、primer(0.4 mmol/L)、DNA(1μL)、Tap酶取1μL、10×buffer取1μL,总反应体系为10 μL;扩增程序为:在94℃下预变性,然后进行42个循环(94℃变性30 s、38℃退火30 s、72℃延伸2min),最后在72℃延伸7 min.结论]提取的罗布麻总DNA均有较高的质量,适合RAPD分析；Tiangen植物基因组DNA提取试剂盒对罗布麻基因组DNA有着良好的提取效果；对罗布麻RAPD-PCR中Mg2+、dNTPs、DNA聚合酶和引物浓度进行优化,较为理想的各因子用量和扩增程序为:Mg2+(2.0 mmol/L)、dNTPs(0.5mmol/L)、primer(0.4 mmol/L)、Tap酶(0.5 U/μL)、DNA(40 ng),总反应体系为10 μL;扩增程序为:在94℃下预变性5 min,然后进行42个循环(94℃变性30 s、38℃退火30 s、72℃延伸2 min),最后在72℃延伸7min.
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| 收稿时间： | 2013-03-25 |
Extraction of Apocynum Genomic DNA and Establishment of RAPD System |
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| SU Qian,L.Extraction of Apocynum Genomic DNA and Establishment of RAPD System[J].Xinjiang Agricultural Sciences,2013,50(3):524. |
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| Authors: | SU Qian L |
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| Keywords: | |
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