| 黑曲霉变种RM48 α 半乳糖苷酶的分离纯化及其酶学性质研究 |
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| 引用本文： | 许尧兴,李艳丽,柳永,许少春,姚晓红.黑曲霉变种RM48 α 半乳糖苷酶的分离纯化及其酶学性质研究[J].浙江大学学报(农业与生命科学版),2009,35(2):147-152. |
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| 作者姓名： | 许尧兴 李艳丽 柳永 许少春 姚晓红 |
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| 作者单位： | 浙江省农业科学院,植物保护与微生物研究所,浙江,杭州,310021 |
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| 基金项目： | 浙江省重大科技攻关项目 |
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| 摘 要： | 经硫酸铵沉淀、疏水柱层析和分子筛层析,从黑曲霉变种RM48(Aspergillus niger v.Tiegh RM48)固体发酵后的浸提液中分离纯化了α-半乳糖苷酶.SDS-PAGE分析表明,此酶蛋白的分子量约为108 kDa.酶学性质研究表明,该酶的最适反应温度是60℃,耐热温度为40℃:最适反应pH为4.5,在pH 3.0～6.0之间保持90%以上的酶活性;在实验的金属离子范围内,所有金属离子对黑曲霉变种RM48α-半乳糖苷酶均有抑制作用,其中Cu2+和Fe2+抑制作用最为显著,Li2+、Zn2+、Mn2+、K+、Na+、Ca2+,Mg2+和Co2+对酶活性有轻微的抑制作用.在pH 4.0和60℃反应条件下此酶的Km为7.37mm01·L-1,Vmax为5618 IU·mg-1·min-1.成熟酶蛋白N端序列为DEKAYSPCYY,与已报道的α-半乳糖苷酶蛋白无同源性.
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| 关 键 词： | 黑曲霉变种RM48 α-半乳糖苷酶 分离纯化 酶学性质 |
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