| 猪传染性胃肠炎病毒TH-98株M蛋白基因的克隆及原核表达 |
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| 引用本文： | 吴凌,李一经,武心镇.猪传染性胃肠炎病毒TH-98株M蛋白基因的克隆及原核表达[J].中国兽医科技,2005,35(11):869-874. |
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| 作者姓名： | 吴凌 李一经 武心镇 |
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| 作者单位： | [1]东北农业大学动物医学院,黑龙江哈尔滨150030 [2]黑龙江八一农垦大学动物科技学院,黑龙江大庆163319 [3]大庆石油管理局农工商牧业公司,黑龙江大庆163454 |
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| 基金项目： | 黑龙江省科委“九五”攻关计划项目（GC018510） |
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| 摘 要： | 构建了TGEV TH-98株M基因序列的原核表达载体，利用RT-PCR方法从TGEV TH98株中扩增出M蛋白基因，并亚克隆至原核表达载体pGEX-6P-1上，转化大肠埃希氏菌BL21（DE3）pLysS，用IPTG诱导重组菌株表达了融合蛋白。结果表明，从TGETH-98株克隆到了M基因cDNA，该基因全长789bp，与T014株、Purdue株、TFI株和96-1933株的M基因同源性分别为92．37％、98．35％、99．87％和96．96％。SDS-PAGE电泳结果显示，重组表达质粒获得了约57ku的目的带，其中M蛋白的分子质量约为31ku，与预期的结果一致；Western-blotting分析表明，融合表达产物可与TGEV全病毒制备的阳性血清发生反应。证实，TGEV的M基因高度保守，构建的M基因原核表达载体pGEX-6P-TM能在大肠埃希氏菌中获得高效表达。
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| 关 键 词： | 传染性胃肠炎病毒 猪 M基因 克隆 测序 原核表达 |
| 文章编号： | 1000-6419（2005）11-0869-06 |
| 收稿时间： | 2005-05-17 |
| 修稿时间： | 2005-10-21 |
Cloning and expression of membrane protein gene of TGEV TH-98 strain in Escherichia coli |
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| WU Ling, LI Yi-jing , WU Xin zhen.Cloning and expression of membrane protein gene of TGEV TH-98 strain in Escherichia coli[J].Chinese Journal of Veterinary Science and Technology,2005,35(11):869-874. |
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| Authors: | WU Ling LI Yi-jing WU Xin zhen |
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| Institution: | 1. College of Veterinary Medicine, Northeast Agricultural University, Science and Technology, Heilongjiang August First Land Reclamation 150030,China; 2. College of Animal Daqing 163319, China ; 3. Corporation of Agriculture, Commerce and Animal Industry, Daqing Petroleum Administrative Bureau, Daqing 163454,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | TGEV swine M gene cloning sequence analysis prokaryotic expression |
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