人IL-3、GM-CSF和Hly基因的cDNA克隆及测序 |
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引用本文: | 孙英民,孙朕,樊宝良.人IL-3、GM-CSF和Hly基因的cDNA克隆及测序[J].中国畜牧兽医,2011,38(4):91-94. |
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作者姓名: | 孙英民 孙朕 樊宝良 |
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作者单位: | 河北农业大学动物科技学院,河北保定 071000 |
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基金项目: | 农业部转基因重大专项,农业部转基因重大专项,国家863计划重点项目 |
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摘 要: | 试验利用PCR技术扩增并获得了人IL-3、GM-CSF和人溶菌酶(human lysozyme,Hly)基因组基因编码区序列,人IL-3和GM-CSF基因PCR产物与pMD19-T连接,Hly基因PCR产物同pEASY-Blunt载体连接,转化大肠杆菌JM109感受态细胞,蓝白斑筛选后经PCR及酶切鉴定,选取测序正确的克隆连接到pIRESneo载体中构建相关真核表达载体,分别用这些基因的表达载体转染PK15细胞,48 h后提取转染细胞的总RNA,并采用RT-PCR方法获得了人IL-3、GM-CSF和Hly基因的cDNA,结果发现,所获得的cDNA序列同NCBI登录的序列完全同源。
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关 键 词: | IL-3基因 GM-CSF基因 Hly基因 cDNA 克隆 测序 |
收稿时间: | 2010-09-15 |
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