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重金属锌螯合物人工抗原的合成与鉴定
引用本文:刘丹,赵丽,刘荣堂,李霞,杨慧,张云显.重金属锌螯合物人工抗原的合成与鉴定[J].安徽农业科学,2009,37(8):3369-3371.
作者姓名:刘丹  赵丽  刘荣堂  李霞  杨慧  张云显
作者单位:甘肃农业大学生命科学技术学院,甘肃兰州,730070;国家蔬菜工程技术研究中心,北京,1000097;国家蔬菜工程技术研究中心,北京,1000097;内蒙古农业大学动物科学与医学学院,内蒙古呼和浩特,010018;甘肃农业大学生命科学技术学院,甘肃兰州,730070;国家蔬菜工程技术研究中心,北京,1000097;北京农产品质量监测与农田环境监测技术研究中心,北京,100097;国家蔬菜工程技术研究中心,北京,1000097
基金项目:国家863专项(2007AA10Z439); 国家自然科学基金项目(30671205)
摘    要:目的]合成并鉴定重金属锌螯合物抗原,为制备重金属锌螯合物抗原特异性单克隆抗体和建立快速检测方法奠定基础。方法]用二喹啉甲酸(BCA)法测定抗原浓度,利用SDS—PAGE电泳定性鉴定半抗原、抗原、KLH和OVA,用石.墨炉原子吸收光谱法检测抗原中Zn^2+离子的含量。结果]利用BCA法检测得分离纯化后的Zn-DTPA-OVA、Zn—DTPA—KLH、DTPA—OVA、DTPA-KLH中蛋白的实际浓度依次为:25.155±0.038、4.195±0.014、9.242±0.015、6.609±0.025mg/ml。最佳反应备件是A液中含有的Zn^2+物质的量是B液中舍有的DTPA物质的量的5倍;螯合剂物质的量与蛋白中赖氨酸物质的量的比例为2:1。通过石墨炉原子吸收光谱法检测得Zn—DTPA—OVA、Zn-DTPA-KLH、DTPA-OVA、DTPA—KLH、HEPES中全Zn^2+的含量依次为:295.0±0.3、49.5±0.5、0、0、0μg/ml。结论]抗原合成是成功的。

关 键 词:  抗原  鉴定

Synthesis and Identification of Artificial Antigen Zinc Chelate
LIU Dan et al.Synthesis and Identification of Artificial Antigen Zinc Chelate[J].Journal of Anhui Agricultural Sciences,2009,37(8):3369-3371.
Authors:LIU Dan
Institution:LIU Dan et al(College of Life Science , Technology,Gansu Agricultural University,Lanzhou,Gansu 730070)
Abstract:Objective] The purpose was to synthesize and identify the antigen zinc chelate so as to lay a foundation for preparing the specific monoclonal antibody of antigen zinc chelate and establishing rapid detection method.Method] The antigen concn.was measured by BCA method,the hapten,antigen,KLH and OVA were identified quanlitatively by SDS-PAGE electrophoresis.The content of zinc ions in antigen was determined by GFAAS method.Result] The actual protein concn.in isolated and purified Zn-DTPA-OVA,Zn-DTPA-KLH,D...
Keywords:Zinc  Antigen  Identification  
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