| 川楝素半抗原设计及其抗体制备 |
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| 引用本文： | 罗利,张静,刘媛,余向阳,马志卿,冯俊涛,刘贤进,张兴.川楝素半抗原设计及其抗体制备[J].中国农业科学,2008,41(8):2332-2338. |
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| 作者姓名： | 罗利 张静 刘媛 余向阳 马志卿 冯俊涛 刘贤进 张兴 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学无公害农药研究服务中心; |
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| 基金项目： | 国家"十五"攻关重大专项
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西北农林科技大学科研专项 |
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| 摘 要： | 【目的】获得抗川楝素的高灵敏度，高特异性多克隆抗体，建立川楝素的间接竞争酶免疫测定（IC-ELISA）方法。【方法】采用酯化反应合成川楝素的半抗原并经HRMS，NMR及IR鉴定；用混合酸酐法和活化酯法分别合成人工免疫抗原与包被抗原；通过免疫动物获得多克隆抗体。【结果】合成了琥珀酸单酰川楝素（TS）和戊二酸单酰川楝素（TG）2种半抗原，与载体蛋白BSA和OVA分别偶联制备了2种免疫原TS-BSA和TG-BSA，及2种包被原TS-OVA和TG-OVA。免疫后获得的2种抗体效价达6.4×104和3.2×105。经4种不同包被原－抗体组合优化，以（TS-Ab，TG-OVA）组合建立的川楝素IC-ELISA检测方法，线性检测范围为0.01～100 µg•ml-1，检测限达0.03 µg•ml-1，抑制中浓度为1.52 µg•ml-1；以（TG-Ab，TG-OVA）组合建立的方法，线性检测范围为0.1～100 µg•ml-1，检测限达0.11 µg•ml-1，抑制中浓度为3.49 µg•ml-1。水样中基于（TS-Ab，TG-OVA）组合的川楝素平均回收率为82.4%～106.0%，精密度为1.1%～14.3%。【结论】通过川楝素半抗原的合理设计，获得了高效价的抗川楝素多克隆抗体，建立了快速有效的川楝素IC-ELISA检测方法。
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| 关 键 词： | 川楝素 半抗原 多克隆抗体 ELISA |
| 收稿时间： | 2007-7-30 |
Haptens Design and Production of Antibodies Against Toosendanin |
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