| 罗非鱼β-肌动蛋白基因启动子的分离及其启动子活性的初步检测 |
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| 引用本文： | 郁二蒙,叶星,王海英,白俊杰,夏仕玲,劳海华,卢迈新.罗非鱼β-肌动蛋白基因启动子的分离及其启动子活性的初步检测[J].农业生物技术学报,2008,16(2):242-247. |
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| 作者姓名： | 郁二蒙 叶星 王海英 白俊杰 夏仕玲 劳海华 卢迈新 |
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| 作者单位： | 1. 中国水产科学研究院珠江水产研究所,广州,510380;上海水产大学生命科学技术学院,上海,200090
2. 中国水产科学研究院珠江水产研究所,广州,510380 |
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| 基金项目： | 广东省科技厅科技计划
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广东省科技重点引导项目
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国家科技支撵计划
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广东省农业科技重大专项基金
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广东省科技攻关项目 |
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| 摘 要： | 采用高保真PCR技术从尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）基因组中分离了β-肌动蛋白（β-actin）基因片段（GenBank登录号：EF026001）。序列分析显示该片段包括长为1643bpβ-actin基因5＇端侧翼区的启动调控区和90bp的部分转录区序列。启动调控区包括一段长为108bpβ-actin基因上游调控序列、β-actin基因不翻译的第1个外显子和第1个内含子。上游调控序列中含有与转录活性密切相关的作用元件：CAAT box,TATA box和CArG box,分别位于转录起始位点上游的-92、-29和-62处。将尼罗罗非鱼β-actin基因的启动调控区定向克隆到不含启动子的红色荧光表达载体pDsRed2-1中,构建了重组荧光表达载体。重组载体经EcoRⅠ线性化后,采用显微注射技术将其注射到唐鱼（Tanichthys albonubes）的受精卵中,利用荧光显微镜观察外源基因增强型红色荧光蛋白基因（DsRed2）在唐鱼中的表达。结果表明,在荧光显微镜下以及普通解剖镜下均可观察到红色荧光,说明本实验分离到的罗非鱼β-actin基因启动子序列具有有效的驱动功能。
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| 关 键 词： | 罗非鱼 β-肌动蛋白启动子 红色荧光蛋白 转基因 显微注射 |
| 文章编号： | 1006-1304(2008)02-0242-06 |
| 修稿时间： | 2007年6月12日 |
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