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| 嗜麦芽窄食单胞菌角蛋白酶基因(KerF)的克隆及其在大肠杆菌中的表达 | |
| 引用本文： | 邹晓凤,岳寿松,宋爱荣,尤升波,游银伟,黄亦钧,朱友峰.嗜麦芽窄食单胞菌角蛋白酶基因(KerF)的克隆及其在大肠杆菌中的表达[J].农业生物技术学报,2011,19(2). |
| 作者姓名： | 邹晓凤 岳寿松 宋爱荣 尤升波 游银伟 黄亦钧 朱友峰 |
| 作者单位： | 1. 青岛农业大学生命科学学院,青岛,266109 2. 青岛农业大学生命科学学院,青岛266109;山东省农业科学院高新技术研究中心,济南250100 3. 山东省农业科学院高新技术研究中心,济南,250100 |
| 基金项目： | 山东省农业科学院创新基金项目，山东省农业科学院青年基金项目 |
| 摘 要： | 为研究嗜麦芽窄食单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)降解羽毛的机理,本研究克隆了嗜麦芽窄食单胞菌角蛋白酶基因(KerF),并获得其全长基因序列1981 bp,含有1个1743 bp的开放阅读框,编码580个氨基酸(GeneBank登陆号HM590650),将角蛋白酶KerF基因连入表达载体pET28a(+)中,构建重组表达质粒pET28-KerF并转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3),获得重组工程菌.采用金属Ni+螯和层析柱对所表达的角蛋白酶进行纯化,获得分子量为50 kD的重组角蛋白酶KerF.该酶的最适温度为50℃,最适pH值为9.0.金属离子Mn2+、Co2+、Mg2+、Ni+、Ba2+、Zn2+、Ca2+、Fe3+及蛋白酶抑制剂二苯基甲基磺酰氟(PFSM)能强烈抑制该酶活性,乙胺四乙酸(EDTA)对该酶活具有促进作用.本研究结果表明,嗜麦芽窄单胞菌角蛋白酶基因在大肠杆菌中获得成功表达,重组角蛋白酶KerF为碱性丝氨酸蛋白酶. |
| 关 键 词： | 嗜麦芽窄食单胞菌 角蛋白酶 表达 酶学性质 |
Cloning of Stenotrophomonas maltophilia Keratinase Gene (KerE) and Its Expression in Escherichia coli |
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| Zou Xiaofeng,Yue Shousong,Song Airong,You Shengbo,You Yinwei,Huang Yijun,Zhu Youfeng.Cloning of Stenotrophomonas maltophilia Keratinase Gene (KerE) and Its Expression in Escherichia coli[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2011,19(2). | |
| Authors: | Zou Xiaofeng Yue Shousong Song Airong You Shengbo You Yinwei Huang Yijun Zhu Youfeng |
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