发酵饲料中乳酸菌含量检测的EMA-qPCR方法 |
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引用本文: | 胡会龙,魏小兵,王秋霞,欧长波,闫艺婷,吕玉琼,刘兴友.发酵饲料中乳酸菌含量检测的EMA-qPCR方法[J].畜牧兽医学报,2019(10). |
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作者姓名: | 胡会龙 魏小兵 王秋霞 欧长波 闫艺婷 吕玉琼 刘兴友 |
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作者单位: | 河南科技学院动物科技学院;畜禽智能化清洁生产河南省工程实验室;新乡学院 |
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摘 要: | 旨在快速检测发酵饲料中乳酸菌含量,将叠氮溴乙锭(EMA)与q-PCR技术相结合,通过对诸如EMA浓度、曝光时间等影响EMA的因素进行探索,确定EMA的作用条件。在试验条件下用EMA处理已知浓度的乳酸菌菌液,提取乳酸菌DNA,结合q-PCR建立Ct值与乳酸菌含量对数值之间的标准曲线。利用标准曲线,快速计算发酵饲料中的乳酸菌含量。结果表明EMA浓度在3~4μg·mL~(-1)曝光10 min可有效抑制死菌DNA的扩增,从而消除死菌DNA扩增对Ct值的影响。通过对8份发酵饲料进行检测,其结果与平板计数具有较高的符合度。EMA-qPCR方法可用于快速准确地检测发酵饲料中活的乳酸菌含量。
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