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猪Mx1基因及分段基因真核表达载体的构建和鉴定
引用本文:田云飞,胡悦,齐静,吴香菊,孙吉谦,崔云前,刘新利,杜以军.猪Mx1基因及分段基因真核表达载体的构建和鉴定[J].畜牧与兽医,2019(4):65-69.
作者姓名:田云飞  胡悦  齐静  吴香菊  孙吉谦  崔云前  刘新利  杜以军
作者单位:齐鲁工业大学生物工程学院;山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室/山东省农业科学院畜牧兽医研究所;山东省农业科学院生物技术研究中心;山东省青岛市西海岸新区畜牧兽医局
摘    要:试验旨在通过对猪Mx1基因及其分段基因的真核表达载体的构建和鉴定,为进一步研究Mx1基因的功能奠定基础。试验以猪Mx1的基因序列为基础,以真核表达质粒pXJ41为载体,依据Mx1的蛋白结构进行分段,添加了Flag标签,构建了Mx1及Mx1分段基因的真核表达质粒,分别命名为pXJ41-Flag-Mx1、pXJ41-Flag-G、pXJ41-Flag-GMD、pXJ41-Flag-MDL4、pXJ41-Flag-GED。然后通过免疫印迹试验检测上述质粒在HEK-293T细胞中的表达情况,通过间接免疫荧光试验鉴定目的蛋白在细胞内的定位情况。免疫印迹试验成功检测到了Mx1及Mx1分段基因的蛋白条带,间接免疫荧光试验检测到各目的蛋白定位于细胞质。上述真核表达质粒可在HEK-293T细胞中成功表达,Mx1及其分段真核表达质粒的构建和成功表达及定位对进一步探索Mx1的功能及机制奠定了基础。

关 键 词:Mx1基因  真核表达  抗病毒蛋白  蛋白分段  免疫印迹

Construction andidentification of porcine Mx1 and its segment genes
Abstract:
Keywords:
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