3种病原菌多重IMS-荧光RPA检测体系的建立及初步应用 |
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引用本文: | 李轲,郭华麟,禹建鹰,张淑霞,连素梅,徐超,韩国全,郭会清.3种病原菌多重IMS-荧光RPA检测体系的建立及初步应用[J].畜牧与兽医,2019(3):106-112. |
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作者姓名: | 李轲 郭华麟 禹建鹰 张淑霞 连素梅 徐超 韩国全 郭会清 |
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作者单位: | 郑州海关;四川农业大学;石家庄海关 |
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摘 要: | 建立一种同时检测沙门氏菌、大肠杆菌O157:H7和布氏杆菌的快速、灵敏、高通量的检测方法。利用特异性免疫磁珠,在37℃条件下从200 mL样液体系中循环捕获目标致病菌。磁珠液提取DNA后,对3种病原菌进行多重IMS-荧光RPA检测。结果表明:针对沙门氏菌、大肠杆菌O157:H7和布氏杆菌的检测限分别达到3.0、4.5和8.7 CFU/mL。使用新建多重IMS-荧光RPA方法对人工感染60份皮张、毛皮纺织品DNA样本进行扩增,结果显示与预期结果一致;对60份公共场所收集的皮张、毛皮、纺织品DNA样本进行扩增,结果显示有2个样本沙门氏菌阳性、1个样本大肠杆菌O157:H7阳性,3份阳性样品送测序,测序结果与GenBank检索沙门氏菌、大肠杆菌O157:H7 DNA序列一致。得出结论:建立的多重IMS-荧光RPA检测体系灵敏度、特异性、准确度符合要求,能够在2 h内完成对3种病原菌检测,可以作为快速应对此三类病原菌安全突发事件的检测手段。
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关 键 词: | 免疫磁珠分离 荧光RPA 沙门氏菌 大肠杆菌O157:H7 布氏杆菌 |
Establishment and preliminary application of multiple IMS real-time-RPA detection system for three pathogenic bacteria |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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