| 脾酪氨酸激酶参与酿酒酵母甘露聚糖诱导绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1(SBD-1)的表达 |
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| 引用本文： | 金鑫,张曼,杨银凤.脾酪氨酸激酶参与酿酒酵母甘露聚糖诱导绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1(SBD-1)的表达[J].畜牧兽医学报,2019(5):1082-1090. |
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| 作者姓名： | 金鑫 张曼 杨银凤 |
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| 作者单位： | 内蒙古农业大学兽医学院;农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31560682);内蒙古自治区研究生教育创新计划资助项目(B20171012921) |
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| 摘 要： | 为了探索脾酪氨酸激酶(Syk)是否参与酿酒酵母甘露聚糖(S.c M)诱导绵羊瘤胃上皮细胞(ORECs)β-防御素-1(SBD-1)表达的过程,首先利用免疫组化、RT-PCR和免疫荧光等方法检测Syk在ORECs内的表达情况;然后采用qPCR和Western blot方法检测S.c M刺激ORECs后Syk的表达变化,同时用Western blot方法检测Syk的磷酸化水平;接着用3条Syk特异性siRNAs(#1、#2和#3)转染ORECs 24 h后,qPCR检测Syk mRNA的表达变化,筛选出干扰效果最佳的Syk siRNA;最后用效果最佳的siRNA和Syk特异性抑制剂R406分别处理ORECs后,采用qPCR和ELISA检测SBD-1的表达变化,以确定Syk在S.c M诱导SBD-1表达过程中的作用。结果显示:Syk在ORECs内表达;且S.c M刺激ORECs后Syk的mRNA和蛋白表达水平显著高于未刺激组(P<0.01或P<0.05),S.c M刺激ORECs不同时间(5、15、30、45和60 min)均能使Syk发生磷酸化,且刺激15 min后磷酸化水平达到最大(P<0.01);此外,Syk的3条特异性siRNAs转染ORECs后Syk的表达均降低,且Syk siRNA#2的抑制效果最明显(P<0.01);同时Syk siRNA#2和R406均能极显著降低S.c M诱导ORECs SBD-1的表达(P<0.01)。上述结果表明,Syk参与S.c M诱导ORECs SBD-1的表达。
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| 关 键 词： | 酿酒酵母甘露聚糖 绵羊β-防御素-1 瘤胃上皮细胞 SYK |
Syk is Involved in the Expression of SBD-1 in Ovine Ruminal Epithelial Cells Induced by Saccharomyces cerevisiae Mannan |
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| JIN Xin,ZHANG Man,YANG Yinfeng.Syk is Involved in the Expression of SBD-1 in Ovine Ruminal Epithelial Cells Induced by Saccharomyces cerevisiae Mannan[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2019(5):1082-1090. |
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| Authors: | JIN Xin ZHANG Man YANG Yinfeng |
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| Institution: | (College of Veterinary Medicine,Inner Mongolia Agricultural University,Hohhot 010018,China;Key Laboratory of Clinical Diagnosis and Treatment Technology in Animal Disease of Ministry of Agriculture,Hohhot 010018,China) |
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| Abstract: | JIN Xin;ZHANG Man;YANG Yinfeng(College of Veterinary Medicine,Inner Mongolia Agricultural University,Hohhot 010018,China;Key Laboratory of Clinical Diagnosis and Treatment Technology in Animal Disease of Ministry of Agriculture,Hohhot 010018,China) |
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| Keywords: | Saccharomyces cerevisiae Mannan sheep β-defensin-1 ruminal epithelial cells spleen tyrosine kinase |
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