牛诺瓦病毒和牛轮状病毒双重RAA-LFD快速检测方法的建立及应用 |
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引用本文: | 李惠惠,董可儿,刘馨博,张春晓,马超,陈利苹,钟旗,姚刚,马雪连.牛诺瓦病毒和牛轮状病毒双重RAA-LFD快速检测方法的建立及应用[J].畜牧兽医学报,2024(1):406-412. |
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作者姓名: | 李惠惠 董可儿 刘馨博 张春晓 马超 陈利苹 钟旗 姚刚 马雪连 |
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作者单位: | 1. 新疆农业大学动物医学学院;3. 乌鲁木齐市动物园;4. 深圳市真瑞生物有限公司;5. 新疆畜牧科学院兽医研究所 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(32002251):肉生高效健康饲养技术集成研究与示范(2021A02003-1); |
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摘 要: | 为建立能同时检测牛诺瓦病毒(bovine norovirus, BNoV)和牛轮状病毒(bovine rotavirus, BRV)的重组酶辅助扩增-侧流层析试纸条(recombinase aided amplification-lateral flow dipstick, RAA-LFD)快速检测方法。本试验按照RAA引物探针设计原则,分别针对BNoV RdRp基因和BRV VP7基因的保守区设计引物和探针,制备标准重组质粒,建立并优化RAA-LFD反应体系,同时对该检测方法进行特异性、敏感性及重复性评估,用建立的RAA-LFD法与PCR法、qPCR法分别对采集的168份腹泻犊牛的临床样本进行平行检测。结果显示,该方法可在20 min, 39℃的条件下扩增目标片段,对BNoV和BRV敏感度均为103 copies·μL-1,与PCR的检测结果基本一致,且与牛冠状病毒(bovine coronavirus, BCoV)、牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus, BVDV)和牛传染性鼻气管炎病毒(infecti...
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关 键 词: | 牛诺瓦病毒 牛轮状病毒 重组酶介导扩增 侧向流试纸条 |
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