| 富士苹果中膜结合态多酚氧化酶分离纯化方法 |
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| 引用本文： | 刘芳,甘芝霖,赵金红,温馨,倪元颖.富士苹果中膜结合态多酚氧化酶分离纯化方法[J].农业机械学报,2015,46(2):193-197,246. |
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| 作者姓名： | 刘芳 甘芝霖 赵金红 温馨 倪元颖 |
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| 作者单位： | 中国农业大学,中国农业大学,中国农业大学,中国农业大学,中国农业大学 |
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| 基金项目： | “十二五”国家科技支撑计划资助项目(2012BAD31B00) |
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| 摘 要： | 以烟台红富士为原料,研究膜结合态多酚氧化酶(m PPO)的分离纯化条件,采用非离子型去污剂结合热诱导方法粗提,硫酸铵分级沉淀,DEAE Sepharose Fast Flow离子交换柱层析方法对m PPO进行纯化,并对其进行串联质谱(LC-MS/MS)分析鉴定。结果表明m PPO提取纯化最佳条件为:超声提取10 min,50%~80%饱和度硫酸铵沉淀,0.1 mol/L Na Cl梯度洗脱。纯化后的m PPO纯度提高了64.30倍,比活力高达387 032.97 U/mg。纯化后的m PPO经SDS-PAGE和Native-PAGE分析均为单一蛋白带,且为亚基分子量67 k Da的二聚体。经串联质谱分析及蛋白数据库鉴定此纯化蛋白为多酚氧化酶。
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| 关 键 词： | 富士苹果 多酚氧化酶 分离纯化 膜结合态 离子交换柱层析 串联质谱 |
| 收稿时间： | 2014/4/14 0:00:00 |
Isolation and Purification Method of Membrane-bound Polyphenol Oxidase in Fuji Apple |
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| Liu Fang,Gan Zhilin,Zhao Jinhong,Wen Xin and Ni Yuanying.Isolation and Purification Method of Membrane-bound Polyphenol Oxidase in Fuji Apple[J].Transactions of the Chinese Society of Agricultural Machinery,2015,46(2):193-197,246. |
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| Authors: | Liu Fang Gan Zhilin Zhao Jinhong Wen Xin and Ni Yuanying |
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| Institution: | China Agricultural University,China Agricultural University,China Agricultural University,China Agricultural University and China Agricultural University |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Fuji apple Polyphenol oxidase Isolation and purification Membrane-bound Specific activity Anionic column chromatography |
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