| 绵羊痘病毒多表位基因的构建及原核表达 |
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| 引用本文： | 陈轶霞,王明明,龙玲,邵忠伟,刘俊林.绵羊痘病毒多表位基因的构建及原核表达[J].华中农业大学学报,2015,34(2):86-90. |
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| 作者姓名： | 陈轶霞 王明明 龙玲 邵忠伟 刘俊林 |
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| 作者单位： | 西北民族大学生命科学与工程学院,兰州,730124 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（31260609；31360533）； 西北民族大学中央高校基本科研业务费专项 (ZYZ2012072) |
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| 摘 要： | 通过计算机软件筛选出绵羊痘病毒基因组中心编码区的ORF90核蛋白、ORF112融合蛋白、ORF117糖蛋白、ORF55膜蛋白和基因组末端的ORF134宿主范围相关基因的6段T、B细胞优势抗原表位,以柔性氨基酸(GPGPG)作为接头,串联合成1条全新的多表位嵌合基因mE,将其克隆到原核表达载体pET-32中,采用酶切分析与序列测定方法筛选鉴定阳性重组质粒,构建pET32-mE质粒;用IPTG在不同条件下诱导表达,确定最佳表达条件,表达产物经SDS-PAGE分析。结果表明,重组蛋白是分子质量为41ku的融合蛋白。在IPTG浓度为0.5mmol/L,温度为37℃、诱导4h时目的蛋白的表达量最大,约占菌体的32%。Western-blotting试验表明,目的蛋白可被羊痘血清识别。
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| 关 键 词： | 绵羊痘病毒 抗原表位 多表位 嵌合基因 原核表达 |
| 收稿时间： | 2014/4/22 0:00:00 |
Construction and prokaryotic expression of multi-epitope chimeric gene of sheeppox virus |
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| CHEN Yi-xia
,
WANG Ming-ming
,
LONG Ling
,
SHAO Zhong-wei
,
LIU Jun-lin.Construction and prokaryotic expression of multi-epitope chimeric gene of sheeppox virus[J].Journal of Huazhong Agricultural University,2015,34(2):86-90. |
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| Authors: | CHEN Yi-xia WANG Ming-ming LONG Ling SHAO Zhong-wei LIU Jun-lin |
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| Institution: | CHEN Yi-xia;WANG Ming-ming;LONG Ling;SHAO Zhong-wei;LIU Jun-lin;College of Life Science and Engineering,Northwest University for Nationalities; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | sheeppox virus epitope multi-epitope chimeric gene prokaryotic expression |
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