| 氟苯尼考耐药菌的构建及大肠杆菌中FloR蛋白定位 |
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| 引用本文： | 吴蓓蓓,杜向党.氟苯尼考耐药菌的构建及大肠杆菌中FloR蛋白定位[J].畜牧兽医学报,2008,39(10). |
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| 作者姓名： | 吴蓓蓓 杜向党 |
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| 作者单位： | 1. 浙江大学,杭州,310029
2. 河南农业大学,郑州,450002 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，国家科技支撑计划项目 |
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| 摘 要： | 通过对floR基因序列的分析,将扩增的包含floR基因上游调控序列及下游终止序列的约1550 bp DNA片段克隆到pGEM-T easy载体上,成功构建了pGEM-floR质粒,将质粒转入JM109中,药物敏感性试验显示构建的pGEM-floR/JM109基因工程菌对氯霉素和氟苯尼考高度耐药,对四环素和庆大霉素敏感.本试验成功构建了一个基因背景清楚且对氟苯尼考耐药的细菌模型,排除了细菌中其他氟苯尼考耐药基因或泵出蛋白对floR基因贡献细菌耐药表型及进一步试验的影响.分别提取CVM1841、pGEM-floR/JM109、pGEM/JM109和JM109膜蛋白,运用实验审制备的鼠抗GsT-FloR1抗体进行免疫印迹反应,蛋白定位显示FloR蛋白位于细菌的细胞膜上.本试验结果证实floR基因编码的蛋白位于细胞膜,并贡献细菌对氯霉素和氟苯尼考的交叉耐药性.
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| 关 键 词： | 氟苯尼考 基因克隆 蛋白定位 |
Construction of Florfenicol-resistant Recombinants and Protein Location of FloR in Florfenicoi-resistant E.coli |
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| WU Bei-bei,DU Xiang-dang.Construction of Florfenicol-resistant Recombinants and Protein Location of FloR in Florfenicoi-resistant E.coli[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2008,39(10). |
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| Authors: | WU Bei-bei DU Xiang-dang |
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