| 香蕉线条病毒MP功能域基因的克隆、原核表达及抗血清制备 |
| |
| 引用本文： | 陈 秀,饶雪琴,阮小蕾,李华平.香蕉线条病毒MP功能域基因的克隆、原核表达及抗血清制备[J].华南农业大学学报,2014,35(2):47-52. |
| |
| 作者姓名： | 陈 秀 饶雪琴 阮小蕾 李华平 |
| |
| 作者单位： | 1 博罗县农业科学研究所，2 华南农业大学 资源环境学院，;2 华南农业大学 资源环境学院，;2 华南农业大学 资源环境学院，;2 华南农业大学 资源环境学院， |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金（30671358）；广东省自然科学基金（C036845） |
| |
| 摘 要： | 【目的】制备香蕉线条病毒广东分离物(BSV-GD)MP功能域基因编码蛋白的多克隆抗血清,为BSV基因编码蛋白功能的研究提供条件.【方法】对BSV-GD ORF3基因氨基酸序列进行生物信息学分析,得出MP功能域基因序列,克隆该基因并插入载体pET-28b(+)构建原核表达载体,经IPTG诱导表达后,采用超声波裂解法进行蛋白可溶性分析,利用组氨酸标签纯化试剂盒对目的融合蛋白进行纯化和回收,然后以纯化的目的蛋白为抗原免疫健康家兔制备其多克隆抗血清;通过Western-blot分析该抗血清的特异性,间接ELISA法检测该抗血清的效价.【结果和结论】MP功能域基因在ORF3中的序列为61~311 aa处,核酸序列长753 bp.试验克隆了该基因并成功构建了其原核表达载体pET28b-MP,经IPTG诱导1 h后表达了相对分子质量约为30 800的融合蛋白6His·MP.可溶性分析表明该融合蛋白以包涵体形式存在,纯化获得了高纯度的目的融合蛋白,以其为抗原成功制备了BSV-GD MP功能域基因编码蛋白的多克隆抗血清;分析表明该抗血清具有很强的特异性,其效价高达204 800倍以上.
|
| 关 键 词： | 香蕉线条病毒 MP功能域基因 原核表达 抗血清 |
| 收稿时间： | 2013/4/16 0:00:00 |
Prokaryotic expression and antiserum preparation for functional domain of Banana streak virus movement protein gene |
| |
| Institution: | 1 Boluo County Institute of Agricultural Sciences,2 College of Natural Resources and Environment, South China Agricultural University,;2 College of Natural Resources and Environment, South China Agricultural University,;2 College of Natural Resources and Environment, South China Agricultural University,;2 College of Natural Resources and Environment, South China Agricultural University, |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Banana streak virus movement protein domain prokaryotic expression antiserum |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《华南农业大学学报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《华南农业大学学报》下载免费的PDF全文 |
|
