| 小鼠IL-1Ra蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备 |
| |
| 引用本文： | 战俊澎,邹德颖,常江,杨馨,郭珣,张凯,刘益辛,胡盼,卢士英,李岩松,柳增善,任洪林.小鼠IL-1Ra蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备[J].江苏农业科学,2022,50(9):37-42. |
| |
| 作者姓名： | 战俊澎 邹德颖 常江 杨馨 郭珣 张凯 刘益辛 胡盼 卢士英 李岩松 柳增善 任洪林 |
| |
| 作者单位： | 人兽共患病研究教育部重点实验室/吉林大学人兽共患病研究所/吉林大学动物医学学院,吉林长春 130062,人兽共患病研究教育部重点实验室/吉林大学人兽共患病研究所/吉林大学动物医学学院,吉林长春 130062;辽宁省盘锦检验检测中心,辽宁盘锦 124000 |
| |
| 基金项目： | 吉林省科技发展计划(编号：YDZJ202101ZYTS124)；;中央高校基本科研业务费专项资金(编号：45121031B007)； |
| |
| 摘 要： | 以小鼠脾脏cDNA为模板，用降落PCR扩增IL-1Ra基因片段，IL-1Ra基因片段长约为537 bp。将IL-1Ra扩增片段和原核表达载体pET-30a(+)连接构建重组表达质粒，在37℃诱导表达，重组表达的小鼠IL-1Ra蛋白的分子质量为19 ku。用纯度较好的小鼠IL-1Ra重组蛋白免疫兔子，制备特异性多克隆抗体；测定多克隆抗体的效价达到1∶4 096 000。经Western-Blot鉴定该抗体可与Raw264.7细胞中表达的小鼠IL-1Ra天然蛋白发生特异性结合。利用实时荧光定量PCR和Western-Blot检测表明布鲁氏菌S2弱毒株感染Raw264.7细胞(小鼠单核巨噬细胞)后小鼠IL-1Ra上调表达。本研究成功制备了小鼠IL-1Ra重组蛋白和兔抗多克隆抗体，为深入探讨小鼠IL-1Ra与布鲁氏菌感染之间的关系提供工具。
|
| 关 键 词： | 小鼠 IL-1Ra 原核表达 多克隆抗体 IL-1Ra重组蛋白 |
| 本文献已被 万方数据 等数据库收录！ |
|
