| 基于RAA-CRISPR/Cas12a的鸡毒支原体核酸检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 王剑,赵普润,崔嘉窈,霍乃蕊.基于RAA-CRISPR/Cas12a的鸡毒支原体核酸检测方法的建立[J].东北农业大学学报,2023(10):28-35. |
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| 作者姓名： | 王剑 赵普润 崔嘉窈 霍乃蕊 |
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| 作者单位： | 山西农业大学动物医学学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金青年项目（32202858）；;山西省高等学校科技创新项目（2021L161）； |
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| 摘 要： | 将重组酶介导的扩增技术（RAA）、CRISPR/Cas12a的切割反应及酶标仪或试纸条相结合，建立设备依赖度低的鸡毒支原体（Mycoplasma gallisepticum,MG）核酸检测方法。以MG基因mgc2为靶标，设计CRISPR RNA及RAA引物，并优化检测体系、评价新建核酸检测方法性能。结果表明，该方法特异性和灵敏性均较好，对除MG外其他常见病原体检测结果均为阴性，检测下限可达10 copies·μL-1。与商业化荧光定量PCR试剂盒对比检测45份临床样品符合率超过93%。综上，通过将RAA与CRISPR/Cas12a相结合，建立一种不依赖昂贵仪器的MG核酸检测方法，具有良好应用前景。
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| 关 键 词： | 鸡毒支原体 CRISPR RAA 核酸检测 |
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