| 啤酒花潜隐类病毒RNA提取方法及检测技术的研究 |
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| 引用本文： | 连海燕,李建光,赵晓丽,吕玉峰,孙宁,邓丛良,许志春.啤酒花潜隐类病毒RNA提取方法及检测技术的研究[J].植物病理学报,2015(3):288-296. |
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| 作者姓名： | 连海燕 李建光 赵晓丽 吕玉峰 孙宁 邓丛良 许志春 |
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| 作者单位： | 北京林业大学;北京出入境检验检疫局;东南大学生物科学与医学工程学院 |
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| 基金项目： | 公益性行业(质检)科研专项(201110035);国家973课题(2011CB932800);质检总局课题(2013IK267) |
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| 摘 要： | 本研究采用纳米磁珠提取法(Magnetic Nanoparticles,MNP)、改良的Li Cl沉淀法、CTAB法、TRIzol法和RNeasy Plant M ini Kit 5种方法提取感染啤酒花潜隐类病毒(Hop latent viroid,HLVd)的啤酒花叶片总RNA,结果显示Li Cl沉淀法、CTAB法和M NP法提取的RNA的质量较好,而M NP法具有提取时间短、操作简便,环境友好和批量提取的优势,适用于啤酒花潜隐类病毒RNA的快速提取。体外转录制备HLVd RNA标准品,利用实时荧光定量RT-PCR绘制标准曲线,并对其特异性、灵敏度进行评估。应用纳米磁珠提取啤酒花总RNA,结合实时荧光RT-PCR技术,建立了HLVd的快速、高效的M NP-RT-q PCR定量检测方法。
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| 关 键 词： | 类病毒 提取方法 实时荧光定量RT-PCR |
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