| Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒RT-PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 程安春,汪铭书,信洪一,陈海军,杨苗,郭宇飞,朱德康,贾仁勇,袁桂萍,陈孝跃.Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒RT-PCR检测方法的建立[J].中国兽医科技,2007,37(1):38-42. |
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| 作者姓名： | 程安春 汪铭书 信洪一 陈海军 杨苗 郭宇飞 朱德康 贾仁勇 袁桂萍 陈孝跃 |
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| 作者单位： | [1]四川农业大学动物科技学院禽病防治研究中心,四川雅安625014 [2]动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川雅安625014 [3]四川农业大学实验动物工程技术中心,四川雅安625014 |
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| 基金项目： | 国家科技攻关重大项目（2004BA901A03）;国家农业科技成果转化资金项目（2006GB2F000249）;教育部“新世纪优秀人才支持计划”项目（NCET-04-0906）;四川省基础研究重大项目（05JY029-109）;四川省杰出青年学科带头人基金后续资助项目（03ZQ026-028）;四川省重点建设学科项目（SZD0418） |
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| 摘 要： | 根据获得的Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒（DHVⅠ）RNA聚合酶基因序列，应用Primer Premier5．0软件设计了1对引物，建立了检测DHVⅠ的RT-PCR方法。该法能从DHVⅠ中扩增到440bp的条带，而对正常鸭胚尿囊液、健康鸭肝、鸭瘟病毒、番鸭细小病毒、鹅细小病毒、雏鹅新型病毒性肠炎病毒、禽流感病毒（H5N2亚型）、鸭病毒性肿头出血症病毒、鸭源多杀性巴氏杆菌（5：A）的扩增结果均为阴性。该法最低可以检测到30pg的DHV工核酸模板。RT-PCR对DHVⅠ强毒CHv-1株人工感染发病死亡鸭肝的检测结果与病毒分离和Dot—ELISA检测结果的阳性检出率均为100％，对脾、肺、脑病料的检出率显著（P≤0．01）高于病毒分离和Dot-ELISA。RT-PCR、病毒分离和Dot—ELSA对1987～2005年采集且保存于-20℃的经病毒分离已确诊为鸭肝炎的临床送检肝病料的检出率分别为100％（19／19）、36．84％（7／19）和57．98％（11／19），对2000-2005年采集且于-20℃保存的来源于中国18个省份发病鸭群的48份肝病料的检出率分别为100％（48／48）、56．25％（27／48）和75．00％（36／48）。结果表明，建立的RT—PCR方法具有良好的特异性和敏感性，可用于DHVⅠ的分离鉴定、临床病料的检测和分子流行病学调查。
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| 关 键 词： | Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒 RT—PCR检测 应用 |
| 文章编号： | 1673-4696（2007）01-0038-05 |
| 收稿时间： | 2006-09-21 |
| 修稿时间： | 2006-12-29 |
Development of a RT-PCR assay to detect duck hepatitis virus type |
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| CHENG An-chun ,WANG Ming-shu ,XIN Hong-yi ,CHEN Hai-jun ,YANG Miao ,GUO Yu-fei ,ZHU De-kang ,JIA Ren-yong ,YUAN Gui ping ,CHEN Xiao-yue.Development of a RT-PCR assay to detect duck hepatitis virus type[J].Chinese Journal of Veterinary Science and Technology,2007,37(1):38-42. |
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| Authors: | CHENG An-chun WANG Ming-shu XIN Hong-yi CHEN Hai-jun YANG Miao GUO Yu-fei ZHU De-kang JIA Ren-yong YUAN Gui ping CHEN Xiao-yue |
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