| 丁香疫霉菌RPA/CRISPR-Cas12a快速检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 雷荣,孙夕雯,江丽,王振华,李国庆,李远,廖晓玲,吴品珊.丁香疫霉菌RPA/CRISPR-Cas12a快速检测方法的建立[J].植物检疫,2022(3):31-38. |
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| 作者姓名： | 雷荣 孙夕雯 江丽 王振华 李国庆 李远 廖晓玲 吴品珊 |
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| 作者单位： | 1. 中国检验检疫科学研究院;2. 沈阳农业大学土地与环境学院;3. 武汉海关;4. 华中农业大学;5. 重庆医科大学永川附属医院;6. 重庆理工大学 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划项目（2021YFC2600402）； |
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| 摘 要： | 丁香疫霉病菌（Phytophthora syringae,PS）造成数十种蔷薇科植物严重病害，是我国的植物检疫性有害生物。本研究根据GenBank中PS的Ras-like protein (Ypt1)基因，建立重组酶聚合酶等温扩增结合CRISPR-Cas12a系统的荧光法和侧向流层析试纸条快速检测方法，以实现在田间或口岸快速、准确、灵敏检测丁香疫霉病菌的目的。本研究优化了RPA/CRISPR-Cas12a的反应条件，考察了特异性、灵敏度以及实际样品检测能力。结果表明，该方法 37℃扩增40 min，能特异性地检测丁香疫霉菌，灵敏度为133 fg，与荧光定量PCR相当。本研究建立的快速检测方法可用于丁香疫霉菌的快速诊断。
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| 关 键 词： | 丁香疫霉病菌 重组酶聚合酶扩增 CRISPR-Cas12a 快速检测 |
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