| 昆明小鼠胚胎成纤维细胞体外培养条件初步研究 |
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| 引用本文： | 曹俊新,宋学雄,孙旺吾,唐元凤.昆明小鼠胚胎成纤维细胞体外培养条件初步研究[J].中国畜牧兽医,2011,38(10):39-44. |
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| 作者姓名： | 曹俊新 宋学雄 孙旺吾 唐元凤 |
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| 作者单位： | 青岛农业大学基础兽医学室,山东青岛 266109 |
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| 基金项目： | 国家转基因重大专项课题(2009ZX08006-007B) |
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| 摘 要： | 本研究旨在探索影响小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblast,MEF)分离培养的因素,建立有效的胚胎成纤维细胞培养体系,为构建饲养层细胞与体细胞核移植技术的细胞核供体建立平台。本研究用组织细胞培养液DMEM作为基础培养液,观察了不同胎龄、不同血清浓度及不同胰蛋白酶作用时间等因素对MEF分离培养的影响。结果显示,在所进行的4个胎龄8.5、10.5、12.5、14.5 d的比较试验中,原代成纤维细胞分离培养的最适胎龄为12.5 d,细胞贴壁迅速,12 h已完全贴壁,增殖速度快;在所进行的不同时间5、10、15、30 min的胰蛋白酶消化中,最佳时间为5~10 min;在所进行的5个血清浓度7%、9%、10%、11%、13%的比较试验中,添加11%胎牛血清浓度培养效果最佳,从3~5代增殖倍数稳定在1.35左右,传代时间也相对较长。以上结果表明,采用12.5 d胎鼠,胰蛋白酶消化5~10 min,在含有11%血清的DMEM培养液中培养MEF细胞时,原代和传代效果最好,传代至第3~5代时细胞生长增殖最旺盛,处于对数分裂期,适宜作为饲养层细胞与体细胞核移植细胞核供体。
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| 关 键 词： | 小鼠 胚胎成纤维细胞 分离培养 |
| 收稿时间： | 2011-03-11 |
Preliminary Study on Culture Condition in vitro of Kunming Mouse Embryonic Fibroblasts |
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| CAO Jun-xin,SONG Xue-xiong,SUN Wang-wu,TANG Yuan-feng.Preliminary Study on Culture Condition in vitro of Kunming Mouse Embryonic Fibroblasts[J].China Animal Husbandry & Veterinary Medicine,2011,38(10):39-44. |
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| Authors: | CAO Jun-xin SONG Xue-xiong SUN Wang-wu TANG Yuan-feng |
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| Institution: | Basical Veterinary Medicine Room,Qingdao Agricultural University, Qingdao 266109, China |
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| Abstract: | To establish a stable culture system of mouse embryonic fibroblast(MEF),in order to construct of MEF feeder layers in vitro and somatic cell nuclear transfer technique nuclei donor build platform.The mouse primary embryonic fibroblasts were isolated from mouse fetus of Kunming white at different gestational ages.According to the influence of different serum and trypsin digestion time on MEF,the growth behavior and the characteristics of MEF were studied.Results showed that,in the form of four gestational ag... |
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| Keywords: | mouse embryonic fibroblast isolation and culture |
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