| 利用种子红色荧光标记鉴定转基因番茄后代 |
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| 引用本文： | 章力,魏凯,李珊珊,宁宇,路菲菲,王孝宣,国艳梅,刘磊,李鑫,杜永臣,李君明,黄泽军.利用种子红色荧光标记鉴定转基因番茄后代[J].山东农业科学,2024(4):1-8. |
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| 作者姓名： | 章力 魏凯 李珊珊 宁宇 路菲菲 王孝宣 国艳梅 刘磊 李鑫 杜永臣 李君明 黄泽军 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业科学院蔬菜花卉研究所/蔬菜生物育种全国重点实验室;2. 中国农业大学园艺学院 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划项目(2022YFD1200500)；;国家大宗蔬菜产业技术体系项目(CARS-23-A06)；;国家自然科学基金项目(31872949)； |
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| 摘 要： | 转基因技术有助于番茄基因功能研究和遗传改良，其中转基因后代的筛选是一个非常重要但工作量大的环节。本研究基于番茄油体蛋白基因家族序列分析和番茄基因表达数据库SGN-TEA搜索结果，克隆了一个种子特异且高水平表达的油体蛋白基因SlOLE1(Solyc06g034040)。利用无缝克隆的方法将红色荧光蛋白基因TagRFP的编码区序列插入到SlOLE1基因的终止密码子前，形成一个嵌合基因SlOLE1-TagRFP。将嵌合基因插入到pBI121双元载体，构建植物表达载体pSlOLE1-TagRFP,利用农杆菌介导法转化番茄品种‘Money Maker’,T0代植株的自交种子在荧光显微镜下呈现出明亮红色荧光或无荧光。PCR分子标记进一步验证发现，红色荧光种子萌发的幼苗均存在TagRFP序列，表明在种子阶段检测红色荧光筛选转基因番茄后代的准确率为100%。由此，本研究建立了一种利用SlOLE1-TagRFP嵌合基因，可以通过种子红色荧光可视化分析，简单快速、低成本地鉴定转基因番茄后代的方法。
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| 关 键 词： | 番茄 种子 红色荧光蛋白 油体蛋白 转基因鉴定 |
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