| 猪传染性胃肠炎病毒检测基因芯片的构建 |
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| 引用本文： | 曹三杰,黄小波,文心田,肖国生.猪传染性胃肠炎病毒检测基因芯片的构建[J].中国兽医学报,2009,29(2). |
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| 作者姓名： | 曹三杰 黄小波 文心田 肖国生 |
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| 作者单位： | 1. 四川农业大学,动物医学院,动物传染病与基因芯片实验室/动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川,雅安,625014
2. 四川农业大学,动物医学院,动物传染病与基因芯片实验室/动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川,雅安,625014;重庆三峡学院,生物系,重庆,404000 |
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| 基金项目： | 教育部长江学者和创新团队发展计划 |
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| 摘 要： | 采用PCR扩增制备TGEV的靶基因并进行纯化,对基因芯片的最佳靶基因点样质量浓度、探针质量浓度、杂交温度、杂交时间进行筛选,选择构建检测芯片的最适靶基因,进行基因芯片探针最佳标记方法试验.结果表明,质粒PCR扩增和采用异丙醇沉淀纯化的靶基因质量好,基因芯片最佳靶基因点样质量浓度为200mg/L,最佳探针质量浓度为3 000 μg/L,预杂交时间为1 h,杂交时间为3～6 h,杂交温度为48℃,以S、S3、sM、M、N、ORF7、POL等7个靶基因为构建TGEV检测芯片的最适靶基因,确定了多重PCR扩增标记TGEV探钟的最佳体系,Cy3-dCTP标记浓度为2.5 μmol/L,构建的TGEV检测芯片与标记的混合探针杂交效果好.
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| 关 键 词： | 猪传染性胃肠炎病毒 检测 基因芯片 构建 |
Construction of detecting genechip for transmissible gastroenteritis virus |
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| CAO San-jie,HUANG Xiao-bo,WEN Xin-tian,XIAO Guo-sheng.Construction of detecting genechip for transmissible gastroenteritis virus[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2009,29(2). |
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| Authors: | CAO San-jie HUANG Xiao-bo WEN Xin-tian XIAO Guo-sheng |
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