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金黄色葡萄球菌ClfA基因的克隆及在大肠杆菌中的表达
引用本文:尹荣兰,杨正涛,张艳晶,刘辉,杨琦,刘珊,张乃生.金黄色葡萄球菌ClfA基因的克隆及在大肠杆菌中的表达[J].中国兽医学报,2009,29(2).
作者姓名:尹荣兰  杨正涛  张艳晶  刘辉  杨琦  刘珊  张乃生
作者单位:吉林大学,畜牧兽医学院,吉林,长春,130062
基金项目:国家自然科学基金,教育部高等学校博士学科点专项科研基金 
摘    要:根据GenBank中ClfA基因序列设计特异性引物,以金黄色葡萄球菌基因组DNA为模板,进行PCR扩增,获得了约2 300 bp的DNA片段.将PCR产物克隆至pMD18-T载体中,构建了克隆质粒pMD18-ClfA.用BamHⅠ和EcoR Ⅰ双酶切pMD18-ClfA和pET28a(+),将纯化的基因ClfA亚克隆至pET28a(+),构建重组质粒pET28a-ClfA,并将其转化至大肠杆菌感受态BL21(DE3)中,经1 mmol/L IPTG诱导和SDS-PAGE分析,在87 000处出现了与目的蛋白一致的外源蛋白带,Western-blotting分析表明,该蛋白具有金黄色葡萄球菌的抗原性.

关 键 词:金黄色葡萄球菌  ClfA基因  克隆  原核表达

Cloning and prokaryotic expression of ClfA of Staphylococcus aureus of cow matitis
YIN Rong-lan,YANG Zheng-tao,ZHANG Yan-jing,LIU Hui,YANG Qi,LIU Shan,ZHANG Nai-sheng.Cloning and prokaryotic expression of ClfA of Staphylococcus aureus of cow matitis[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2009,29(2).
Authors:YIN Rong-lan  YANG Zheng-tao  ZHANG Yan-jing  LIU Hui  YANG Qi  LIU Shan  ZHANG Nai-sheng
Abstract:
Keywords:
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