| 小鼠SOCS3基因真核表达载体的构建及其对3T3-L1细胞凋亡的影响 |
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| 引用本文： | 安 磊,孙 婵,解芸菲.小鼠SOCS3基因真核表达载体的构建及其对3T3-L1细胞凋亡的影响[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2011,39(9):17-23. |
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| 作者姓名： | 安 磊 孙 婵 解芸菲 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学 动物医学院;西北农林科技大学 动物科技学院;西北农林科技大学 动物医学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30871785)；教育部新世纪优秀人才计划项目(NCET-06-0865) |
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| 摘 要： | 【目的】探讨SOCS3对3T3-L1细胞凋亡的影响。【方法】以小鼠脂肪组织提取的RNA为模板,用RT-PCR扩增SOCS3基因,将其克隆至pMD18-T Simple,构建pMD18-T-SOCS3重组质粒,经测序验证后,以pMD18-T-SOCS3为模板扩增SOCS3基因,将其克隆至pEGFP-N1,构建真核重组质粒pEGFP-N1-SOCS3,测序正确后,将重组质粒pEGFP-N1-SOCS3转染3T3-L1细胞,荧光下观察GFP的表达,RT-PCR和Western blotting检测细胞内SOCS3mRNA和蛋白的表达,观察细胞凋亡的变化。【结果】测序表明,pMD18-T-SOCS3和pEGFP-N1-SOCS3的核苷酸序列正确率为100%;在荧光显微镜下发现,脂质体组和SOCS3组均有GFP的表达;RT-PCR和Westernblotting检测表明,3T3-L1细胞中SOCS3mRNA表达显著提高(P<0.05);Hoechst 33258染色发现,SOCS3组的细胞凋亡显著;Bax和c-myc基因的mRNA表达水平显著升高(P<0.05),bcl-2和mcl-1基因表达水平显著降低(P<0.05)。【结论】SOCS3对脂肪细胞凋亡的发生有促进作用。
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| 关 键 词： | 细胞凋亡 SOCS3 pEGFP-N1 |
| 收稿时间： | 2011/2/25 0:00:00 |
Construction of mice SOCS3 eukaryotic vector and its effects on 3T3-L1 cells apoptosis |
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| AN Leia,SUN Chanb,XIE Yun-feia,WANG Yongb,LV Binb,SUN Chaob.Construction of mice SOCS3 eukaryotic vector and its effects on 3T3-L1 cells apoptosis[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2011,39(9):17-23. |
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| Authors: | AN Leia SUN Chanb XIE Yun-feia WANG Yongb LV Binb SUN Chaob |
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| Institution: | AN Leia,SUN Chanb,XIE Yun-feia,WANG Yongb,LV Binb,SUN Chaob(a College of Veterinary Medicine,b College of Animal Science and Technology,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | apoptosis SOCS3 pEGFP-N1 |
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